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B-LCL-HROC285
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Nicht zutreffend (EBV-transformierte B-LCL eines Patienten mit Kolorektalkarzinom im Rahmen des Lynch-Syndroms)
Synonyme
B-LCL CO285, Bc HROC285

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B-LCL-HROC285

Cell line · Artikelnummer 300869

B-LCL-HROC285 is an Epstein-Barr virus (EBV) transformed B lymphocyte cell line derived from a patient, who had colon adenocarcinoma associated with Lynch...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

B-LCL-HROC285 ist eine durch das Epstein-Barr-Virus (EBV) transformierte B-Lymphozyten-Zelllinie, die von einem Patienten stammt, der ein mit dem Lynch-Syndrom assoziiertes Kolonadenokarzinom hatte. Diese spezielle Art von Dickdarmkrebs ist mit dem hereditären nicht-polypösen kolorektalen Karzinom (HNPCC) verbunden, das in der Regel durch Mutationen in DNA-Mismatch-Reparaturgenen verursacht wird. Die B-LCL-HROC285-Zelllinie ermöglicht die Untersuchung von EBV-bedingten Transformationsprozessen in B-Zellen sowie Einblicke in krebsbedingte Immunreaktionen.

B-LCL-HROC285 ist ein wertvolles Instrument, um die Interaktionen des Immunsystems mit Krebszellen zu verstehen, insbesondere wie transformierte B-Zellen mit der Immunumgebung bei kolorektalem Krebs, der durch das Lynch-Syndrom entsteht, interagieren können. Diese Zelllinie ist aufgrund ihres genetischen Hintergrunds und des EBV-Transformationsprozesses, von dem bekannt ist, dass er die B-Zell-Proliferation und die klonale Selektion beeinflusst, für immunologische und onkologische Studien nützlich.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Nicht zutreffend (EBV-transformierte B-LCL eines Patienten mit Kolorektalkarzinom im Rahmen des Lynch-Syndroms)
Anwendungen
T-Zell- und NK-Zell-Assays; HLA-Typisierung; Immunologie des Lynch-Syndroms; mit einem Mismatch-Reparatur-Defekt (MMR-Defekt) assoziierte Immunantwort; Zielzellen für CTL-Assays; HROC-Biobank-Studien mit patientenspezifischer Zuordnung
Synonyme
  • B-LCL CO285
  • Bc HROC285

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
GVO-Status
GMO-S2
Angaben zum GVO-Status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
B-Lymphoblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
B-LCL-HROC285 (Cytion-Katalognummer 300869)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Transformant: EBV

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
30 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch