CHO-PDCD1

Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €.
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Les cellules CHO-PDCD1 sont des cellules d’ovaire de hamster chinois (CHO) recombinantes, modifiées pour exprimer de manière stable la protéine 1 de mort cellulaire programmée humaine (PD-1; PDCD1/CD279), un récepteur inhibiteur de point de contrôle immunitaire présent principalement sur les cellules T activées, les cellules B et d’autres sous-ensembles de cellules immunitaires. La PD-1 est une protéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines; elle agit comme un régulateur essentiel de la tolérance immunitaire par son interaction avec ses ligands PD-L1 (CD274) et PD-L2 (PDCD1LG2). Des modèles CHO exprimant de manière stable la protéine PDCD1 sont couramment développés afin d’assurer une expression contrôlée et reproductible du récepteur pour les essais de liaison et les essais fonctionnels sur cellules.

Les cellules CHO-PDCD1 sont largement utilisées dans les processus de développement en immuno-oncologie et en anticorps thérapeutiques, en particulier pour la caractérisation des anticorps inhibiteurs de points de contrôle, les études d’interaction ligand-récepteur, les mesures d’affinité et les essais de criblage par cytométrie en flux. Ces cellules conviennent également à l’évaluation d’anticorps bispécifiques, de ligands modifiés, de stratégies de ciblage CAR-T et de tests d’occupation des récepteurs impliquant l’axe de signalisation PD-1/PD-L1. Comme les cellules CHO présentent des caractéristiques de croissance robustes, une efficacité de transfection élevée et une faible expression endogène de nombreux récepteurs immunitaires humains, elles constituent un milieu de référence bien défini pour l’étude de la biologie du PD-1 recombinant et du ciblage thérapeutique.

Pour les cultures adhérentes : DMEM : Ham’s F12 (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)

Pour les cultures en suspension : milieu de croissance CHO A (de InSCREENeX; numéro de catalogue InSCREENeX INS-ME-1039)

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

Après la décongélation, divisez les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laissez-les se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.