Pereiti prie turinio
CHO-PDCD1
Audinys
Kiaušidės
Liga
Kinų žiurkėno kiaušidės, neoplazminės; genetiškai modifikuotos, kad ant jų paviršiaus būtų išreikštas PD-1 (PDCD1/CD279)

Dokumentai

CHO-PDCD1

Cell line · Prekės numeris 305973

Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos galioja tik akademiniams ir pelno nesiekiančioms organizacijoms. Komerciniams subjektams kainos...

€1,900.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir nekomerciniams klientams. Komercinėms įmonėms kaina yra apie 6 250 eurų.
Jei atstovaujate komercinei įmonei arba nesate tikri, kuri kategorija jums taikoma, prašome susisiekti su mumis.


CHO-PDCD1 ląstelės yra rekombinantiniai kinų žiurkėno kiaušidžių (CHO) ląstelės, modifikuotos taip, kad stabiliai ekspresuotų žmogaus programuotos ląstelių mirties baltymą 1 (PD-1; PDCD1/CD279) – slopinamąjį imuninio kontrolės punkto receptorių, randamą daugiausia aktyvuotose T ląstelėse, B ląstelėse ir kitose imuninių ląstelių grupėse. PD-1 yra I tipo transmembraninis baltymas, priklausantis imunoglobulino superšeimai, kuris veikia kaip kritinis imuninės tolerancijos reguliatorius, sąveikaujant su savo ligandais PD-L1 (CD274) ir PD-L2 (PDCD1LG2). Stabilūs PDCD1 ekspresuojantys CHO modeliai dažniausiai kuriami siekiant užtikrinti kontroliuojamą ir atkartojamą receptorių ekspresiją ląstelių pagrįstiems jungimosi ir funkciniams tyrimams.

CHO-PDCD1 ląstelės plačiai naudojamos imunoonkologijos ir terapinių antikūnų kūrimo procesuose, ypač kontrolės taškų inhibitorių antikūnų charakterizavimui, ligandų ir receptorių sąveikos tyrimams, afiniteto matavimams ir srauto citometrijos pagrįstiems atrankos tyrimams. Šios ląstelės taip pat tinka bispecifinių antikūnų, modifikuotų ligandų, CAR-T taikymo strategijų ir receptorių užimtumo tyrimų, susijusių su PD-1/PD-L1 signalizacijos ašimi, vertinimui. Kadangi CHO ląstelės pasižymi stipriomis augimo savybėmis, dideliu transfekcijos efektyvumu ir mažu endogeniniu daugelio žmogaus imuninių receptorių ekspresavimu, jos suteikia aiškiai apibrėžtą foną rekombinantinio PD-1 biologijos ir terapinio taikymo tyrimams.

Audinys
Kiaušidės
Liga
Kinų žiurkėno kiaušidės, neoplazminės; genetiškai modifikuotos, kad ant jų paviršiaus būtų išreikštas PD-1 (PDCD1/CD279)
Paraiškos
Antikūnų atranka; PD-1 taikinio imunoterapijos kūrimas; kontrolinių taškų inhibitorių tyrimai; T ląstelių biologija; srauto citometrija

02Klasifikacija

Organizmas
Kinijos žiurkėnas
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Adherentinis ir suspensinis
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This CHO cell line contains a PDCD1 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug 14–16 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
CHO-PDCD1 (Cytion katalogo numeris 305973)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X0

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
PDCD1/CD279

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė

Adherentiškoms kultūroms: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)

Suspensinėms kultūroms: CHO augimo terpė A (iš "InSCREENeX"; "InSCREENeX" katalogo numeris INS-ME-1039)

Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Adherentiškoms kultūroms: Į terpę pridėkite 5% FBS. Pridėkite geneticino (G418-Sulfat), kad galutinė koncentracija būtų 0,5 mg/ml.
Disociacijos reagentas
Adherentiškoms kultūroms: Trypsinas-EDTA
Subkultūrinis auginimas
Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje 5-10 minučių arba tol, kol ląstelės atsiskirs. Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
2–5 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo

Po atšildymo suskirstykite ląsteles santykiu 1:2-1:3 į T25 kolbas ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bei sukibti (jei tai adherencinės kultūros) mažiausiai 24 valandas.

Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Suaugusiųjų

Be to, jums gali prireikti