CHO-PDCD1

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Las células CHO-PDCD1 son células recombinantes de ovario de hámster chino (CHO) modificadas genéticamente para expresar de forma estable la proteína 1 de muerte celular programada humana (PD-1; PDCD1/CD279), un receptor inhibidor de puntos de control inmunitario que se encuentra principalmente en las células T activadas, las células B y otros subconjuntos de células inmunitarias. PD-1 es una proteína transmembrana de tipo I perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas y actúa como regulador crítico de la tolerancia inmunológica a través de la interacción con sus ligandos PD-L1 (CD274) y PD-L2 (PDCD1LG2). Los modelos CHO que expresan PDCD1 de forma estable se desarrollan habitualmente para proporcionar una expresión controlada y reproducible del receptor en ensayos de unión y funcionales basados en células.

Las células CHO-PDCD1 se utilizan ampliamente en los flujos de trabajo de inmuno-oncología y desarrollo de anticuerpos terapéuticos, en particular para la caracterización de anticuerpos inhibidores de puntos de control, estudios de interacción ligando-receptor, mediciones de afinidad y ensayos de cribado basados en citometría de flujo. Estas células también son adecuadas para evaluar anticuerpos biespecíficos, ligandos modificados genéticamente, estrategias de orientación CAR-T y ensayos de ocupación de receptores que involucran el eje de señalización PD-1/PD-L1. Dado que las células CHO presentan características de crecimiento robustas, una alta eficiencia de transfección y una baja expresión endógena de muchos receptores inmunitarios humanos, proporcionan un fondo bien definido para estudiar la biología del PD-1 recombinante y la orientación terapéutica.

Para cultivos adherentes: DMEM:F12 de Ham (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)

Para cultivos en suspensión: CHO Growth Medium A (de InSCREENeX; número de catálogo de InSCREENeX INS-ME-1039)

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía