- Tisu
- Ovarium
- Penyakit
- Ovarium hamster Tiongkok, non-neoplastik; direkayasa secara genetik untuk ekspresi PD-1 (PDCD1/CD279) pada permukaan sel
Dokumen
CHO-PDCD1
Cell line · Nomor produk 305973
Penafian: Harga yang ditampilkan untuk lini sel hanya berlaku bagi pelanggan dari kalangan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya...
Penyesuaian / Rekomendasi
- CHO-PDCD1Cell line€1,900.00
01Informasi umum
- Deskripsi
Pernyataan Penolakan: Harga yang ditampilkan untuk garis sel ini khusus diperuntukkan bagi pelanggan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya sekitar €6.250.
Jika Anda mewakili entitas komersial atau tidak yakin kategori mana yang berlaku, silakan hubungi kami.
Sel CHO-PDCD1 adalah sel ovarium hamster Cina (CHO) rekombinan yang direkayasa untuk secara stabil mengekspresikan protein kematian sel terprogram manusia 1 (PD-1; PDCD1/CD279), sebuah reseptor titik pemeriksaan kekebalan penghambat yang terutama ditemukan pada sel T yang diaktifkan, sel B, dan subset sel kekebalan lainnya. PD-1 adalah protein transmembran tipe I yang termasuk dalam superfamili imunoglobulin dan berfungsi sebagai regulator kritis toleransi imun melalui interaksi dengan ligannya, PD-L1 (CD274) dan PD-L2 (PDCD1LG2). Model sel CHO yang secara stabil mengekspresikan PDCD1 sering dikembangkan untuk menyediakan ekspresi reseptor yang terkontrol dan dapat diulang dalam uji ikatan seluler dan uji fungsional.
Sel CHO-PDCD1 banyak digunakan dalam alur kerja pengembangan onkologi imun dan antibodi terapeutik, terutama untuk karakterisasi antibodi penghambat titik kontrol, studi interaksi ligan-reseptor, pengukuran afinitas, dan uji skrining berbasis sitometri aliran. Sel-sel ini juga cocok untuk mengevaluasi antibodi bispesifik, ligan rekayasa, strategi penargetan CAR-T, dan uji okupansi reseptor yang melibatkan sumbu sinyal PD-1/PD-L1. Karena sel CHO menunjukkan karakteristik pertumbuhan yang kuat, efisiensi transfeksi yang tinggi, dan ekspresi endogen yang rendah dari banyak reseptor imun manusia, sel ini menyediakan latar belakang yang terdefinisi dengan baik untuk mempelajari biologi PD-1 rekombinan dan penargetan terapeutik.
- Tisu
- Ovarium
- Penyakit
- Ovarium hamster Tiongkok, non-neoplastik; direkayasa secara genetik untuk ekspresi PD-1 (PDCD1/CD279) pada permukaan sel
- Aplikasi
- Penyaringan antibodi; pengembangan imunoterapi yang menargetkan PD-1; penelitian penghambat titik kontrol; biologi sel T; sitometri aliran
02Klasifikasi
- Organisme
- Hamster Cina
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Adhesi dan suspensi
- Status GMO
- GMO-S1
- Rincian status GMO
- GMO-S1: This CHO cell line contains a PDCD1 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Jenis sel
- Sel epitel
- Waktu penggandaan
- sekitar 14–16 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- CHO-PDCD1 (nomor katalog Cytion 305973)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8X0
05Ekspresi dan kerentanan
- Reseptor yang diekspresikan
- PDCD1/CD279
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
Untuk kultur yang patuh: DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Untuk kultur suspensi: Media Pertumbuhan CHO A (dari InSCREENeX; nomor katalog InSCREENeX INS-ME-1039)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Untuk kultur yang patuh: Tambahkan media dengan 5% FBS. Tambahkan Geneticin (G418-Sulfat) untuk mencapai konsentrasi akhir 0,5 mg/mL.
- Reagen disosiasi
- Untuk kultur yang patuh: Tripsin-EDTA
- Perbanyakan sel
- Untuk kultur sel yang melekat secara rutin: Aspirasi media kultur lama dari sel yang melekat, dan cuci dengan PBS untuk menghilangkan media yang tersisa. Setelah menyedot PBS, tambahkan volume larutan Trypsin/EDTA yang sesuai berdasarkan ukuran bejana kultur (misalnya, 1 ml untuk labu T25, 3 ml untuk labu T75) dan inkubasi pada suhu kamar atau 37 ° C selama 5-10 menit, atau hingga sel terlepas. Pantau pelepasan di bawah mikroskop, dan ketuk bejana dengan lembut jika perlu untuk melepaskan sel. Setelah terlepas, tambahkan media lengkap untuk menonaktifkan Trypsin/EDTA, resuspensi sel dengan hati-hati, dan pindahkan alikuot suspensi sel ke dalam bejana kultur baru yang berisi media segar. Tempatkan bejana dalam inkubator yang diatur pada suhu 37°C dengan 5%CO2, dan ganti medium setiap 2-3 hari.
- Rasio pemisahan
- 1 sampai 5
- Kepadatan penanaman
- 2 hingga 5 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, pisahkan sel dengan rasio 1:2 hingga 1:3 dalam labu T25 dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan dan melekat (untuk kultur yang melekat) setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- Dewasa
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Penafian
- Sel-sel kami disediakan untuk tujuan penelitian laboratorium in vitro secara eksklusif dan tidak dimaksudkan untuk penggunaan klinis atau diagnostik, dan juga tidak untuk diberikan kepada manusia atau digunakan untuk tujuan kedokteran hewan. Pengguna harus mematuhi semua pedoman dan peraturan yang berlaku untuk penanganan dan penggunaan sel ini dalam lingkungan penelitian.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Berlaku ketentuan perjanjian pihak ketiga
- Ya
.jpg)