Tartalomra ugrás
CHO-PDCD1
Szövet
Petefészek
Betegség
Kínai hörcsög petefészeksejt, nem neoplasztikus; PD-1 (PDCD1/CD279) felszíni expresszióra génmódosítva

Dokumentumok

CHO-PDCD1

Cell line · Termékszám 305973

Jogi nyilatkozat: A sejtvonalak mellett feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az árak...

€1,900.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás

Jogi nyilatkozat: A sejtvonalak mellett feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az ár körülbelül 6 250 euró.
Amennyiben kereskedelmi szervezetet képvisel, vagy nem biztos abban, hogy melyik kategória vonatkozik Önre, kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot.


A CHO-PDCD1 sejtek rekombináns kínai hörcsög petefészek (CHO) sejtek, amelyeket úgy alakítottak ki, hogy stabilan expresszálják az emberi programozott sejthalál fehérje 1-et (PD-1; PDCD1/CD279), egy gátló immunellenőrző pont receptort, amely elsősorban aktivált T-sejtekben, B-sejtekben és más immuncella-alcsoportokban található meg. A PD-1 az immunglobulin szupercsaládhoz tartozó I. típusú transzmembrán fehérje, amely a ligandumokkal, a PD-L1-el (CD274) és a PD-L2-vel (PDCD1LG2) való kölcsönhatásán keresztül az immunológiai tolerancia kritikus szabályozójaként működik. A stabil PDCD1-t expresszáló CHO-modelleket általában azért fejlesztik ki, hogy szabályozott és reprodukálható receptor-expressziót biztosítsanak sejtalapú kötődési és funkcionális vizsgálatokhoz.

A CHO-PDCD1 sejteket széles körben használják az immuno-onkológiában és a terápiás antitestek fejlesztési munkafolyamataiban, különösen a checkpoint inhibitor antitestek jellemzéséhez, a ligand-receptor kölcsönhatások vizsgálatához, az affinitásmérésekhez és az áramlási citometrián alapuló szűrővizsgálatokhoz. Ezek a sejtek alkalmasak bispecifikus antitestek, módosított ligandumok, CAR-T célzási stratégiák, valamint a PD-1/PD-L1 jelátviteli tengelyt érintő receptor-foglaltsági vizsgálatok értékelésére is. Mivel a CHO-sejtek robusztus növekedési jellemzőkkel, magas transzfekciós hatékonysággal és számos humán immunreceptor alacsony endogén expressziójával rendelkeznek, jól definiált hátteret biztosítanak a rekombináns PD-1 biológiájának és terápiás célzásának tanulmányozásához.

Szövet
Petefészek
Betegség
Kínai hörcsög petefészeksejt, nem neoplasztikus; PD-1 (PDCD1/CD279) felszíni expresszióra génmódosítva
Alkalmazások
Antitest-szűrés; PD-1-ellenes immunterápia fejlesztése; ellenőrzőpont-gátlók kutatása; T-sejt-biológia; áramlási citometria

02Osztályozás

Organizmus
kínai hörcsög
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Adherens és szuszpenziós
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This CHO cell line contains a PDCD1 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek
Kettőzési idő
kb. 14–16 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
CHO-PDCD1 (Cytion katalógusszám: 305973)
NCBI adóazonosító szám
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X0

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
PDCD1/CD279

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj

Adhezív kultúrákhoz: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)

Szuszpenziós kultúrákhoz: CHO Growth Medium A (az InSCREENeX-től; az InSCREENeX katalógusszáma: INS-ME-1039)

Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
Adhezív kultúrákhoz: A táptalajt 5% FBS-szel egészítsük ki. Adjunk hozzá geneticint (G418-Sulfat), hogy a végső koncentráció 0,5 mg/ml legyen.
Diszociációs reagens
Adhezív kultúrákhoz: Trypsin-EDTA
Átültetés
Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjunk hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű tripszin/EDTA-oldatot (pl. 1 ml T25 lombik esetén, 3 ml T75 lombik esetén), és inkubáljuk szobahőmérsékleten vagy 37°C-on 5-10 percig, vagy amíg a sejtek leválnak. Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek kiszabadításához. A leválás után adjunk hozzá teljes tápfolyadékot a tripszin/EDTA inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
2–5 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás

A felolvasztás után osszuk a sejteket 1:2-1:3 arányban T25 lombikokba, és hagyjuk, hogy a sejtek legalább 24 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból és megtapadjanak (adhezív kultúrák esetén).

Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Felnőtt