LLC-MK2

La LLC-MK2 est une lignée cellulaire épithéliale continue établie à partir de tissu rénal de singes rhésus adultes (*Macaca mulatta*). Cette lignée cellulaire a été initialement isolée dans les années 1950 par trypsinisation d’un mélange de tissus rénaux provenant de six singes rhésus. Les cellules LLC-MK2 présentent des caractéristiques de croissance adhérente et ont été largement utilisées en virologie en raison de leur grande sensibilité à divers virus, notamment le virus de la diarrhée virale bovine de type 1, le poliovirus humain de type 1 et le coxsackievirus humain B4. L’origine de la lignée cellulaire et sa sensibilité aux virus en font un modèle idéal pour l’étude de la réplication virale et des effets cytopathogènes.

La lignée cellulaire LLC-MK2 est connue pour sa capacité à être cultivée dans des milieux chimiquement définis et sans sérum, ce qui permet de contrôler les conditions expérimentales. Des recherches ont démontré que ces cellules peuvent s’adapter à des conditions sans sérum sans compromettre leur croissance, bien que les cultures initiales aient été maintenues dans des milieux contenant des quantités importantes de sérum de cheval. L’adaptation à des milieux chimiquement définis est particulièrement avantageuse pour les études virologiques, car elle minimise la variabilité introduite par le sérum et favorise le maintien à long terme de la lignée cellulaire. De plus, il a été démontré que la lignée LLC-MK2 conserve une sensibilité aux virus comparable à celle des cellules rénales primaires de singe, ce qui en fait un outil fiable pour les études de titrage viral et de production de vaccins.

Outre son rôle en virologie, la lignée LLC-MK2 a également fait l’objet d’études concernant son potentiel tumorigène. Bien qu’elle présente certaines caractéristiques de transformation, telles que la capacité de croître dans de l’agar mou, elle ne forme pas de tumeurs dans les modèles in vivo, ce qui suggère un risque tumorigène limité. Cette caractéristique souligne encore davantage son utilité en tant que lignée cellulaire modèle pour les études in vitro, tout en confirmant qu’elle ne convient pas aux applications thérapeutiques ou in vivo.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.