LLC-MK2

LLC-MK2是一种从成年恒河猴（*Macaca mulatta*）肾组织中建立的连续上皮细胞系。该细胞系最初是在 20 世纪 50 年代通过胰蛋白酶化 6 只恒河猴的肾脏组织而分离出来的。LLC-MK2 细胞具有粘附生长特性，对各种病毒（包括牛病毒性腹泻病毒 1、人脊髓灰质炎病毒 1 和人柯萨奇病毒 B4）具有高度敏感性，因此被广泛用于病毒学研究。该细胞系的来源和对病毒的敏感性使其成为研究病毒复制和细胞致病效应的理想模型。

众所周知，LLC-MK2 细胞系可在化学定义的无血清培养基中培养，从而实现可控的实验条件。研究表明，这些细胞可以适应无血清条件而不影响生长，尽管最初的培养物是在含有大量马血清的培养基中维持的。适应化学定义的培养基对病毒学研究尤其有利，因为它能最大限度地减少血清带来的变异性，并支持细胞系的长期维持。此外，LLC-MK2 细胞系对病毒的敏感性与原代猴肾细胞相当，因此是病毒滴定和疫苗生产研究的可靠工具。

除了在病毒学方面的作用外，LLC-MK2 还具有致瘤潜力。虽然它具有某些转化特性，如在软琼脂中生长的能力，但在体内模型中不会形成肿瘤，这表明其致瘤风险有限。这一特性进一步突出了它作为体外研究的模型细胞系的实用性，同时也证实了它不适合用于治疗或体内应用。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。