LLC-MK2

LLC-MK2 是一種從成年獼猴（*Macaca mulatta*）腎組織建立的連續上皮細胞系。該細胞系最初於 1950 年代透過對六隻獼猴的混合腎組織進行胰蛋白酶消化而分離出來。 LLC-MK2 細胞具有貼壁生長特性，且因對多種病毒（包括牛病毒性腹瀉病毒 1 型、人類小兒麻痺病毒 1 型及人類柯薩奇病毒 B4 型）高度易感，因此在病毒學研究中被廣泛應用。 該細胞系的來源及其對病毒的高易感性，使其成為研究病毒複製與細胞病變效應的理想模型。

LLC-MK2 細胞系以其能在化學定義的無血清培養基中培養而聞名，這使得實驗條件得以受控。研究表明，儘管最初的培養是在含有大量馬血清的培養基中進行的，但這些細胞仍能適應無血清條件而不影響生長。 適應化學定義培養基對於病毒學研究尤為有利，因為這能將血清引入的變異性降至最低，並有助於細胞系的長期維持。此外，研究顯示 LLC-MK2 細胞系所維持的病毒敏感性與原代猴腎細胞相當，使其成為病毒滴度測定及疫苗生產研究的可靠工具。

除了在病毒學領域的作用外，LLC-MK2 亦曾被研究其致瘤潛力。儘管它表現出某些轉化特徵（例如能在軟瓊脂中生長），但在體內模型中並未形成腫瘤，這表明其致瘤風險有限。 此特性進一步凸顯其作為體外研究模型細胞系的實用性，同時也證實其不適合用於治療或體內應用。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。