LS174T

La lignée cellulaire LS147T est une variante de la lignée LS-180; toutes deux proviennent d’un adénocarcinome du côlon de type B de Duke chez une patiente blanche âgée de 58 ans. La lignée LS-180 d’origine a été établie par culture de tissu tumoral broyé pendant 10 mois. La lignée LS-147T, tout comme sa lignée mère, se distingue par l’expression de plusieurs oncogènes, notamment myc, myb, ras et fos, tout en étant négative pour d’autres tels que sis, abl et ros. Cette lignée exprime également des niveaux élevés d’antigène carcino-embryonnaire (ACE), d’interleukine 6 (IL-6) et d’interleukine 10 (IL-10), qui constituent des marqueurs importants et des cibles potentielles dans la recherche sur le cancer colorectal.

Ces cellules présentent plusieurs caractéristiques clés des cellules épithéliales coliques, notamment des microvillosités abondantes et des vacuoles de mucine intracytoplasmiques, qui sont des traits typiquement associés aux cellules sécrétrices de la muqueuse colique. Des études au microscope électronique ont confirmé ces détails structurels, ce qui corrobore davantage leur origine et leur statut de différenciation. Il est important de noter que les cellules LS-147T se sont révélées tumorigènes chez des souris immunodéprimées, produisant systématiquement des tumeurs lorsqu’elles sont inoculées par voie sous-cutanée à des densités cellulaires élevées, ce qui confirme leur potentiel malin.

De plus, la lignée cellulaire LS-147T est particulièrement précieuse dans les études portant sur les aspects moléculaires et immunologiques du cancer colorectal. Il a été rapporté que cette lignée est plus facile à repiquer que sa lignée parente, LS-180, ce qui en fait un choix plus pratique pour les études à long terme. La production importante de CEA par ces cellules, qui est nettement supérieure à celle d’autres lignées établies comme la HT-29, fait de la LS-147T un modèle essentiel pour comprendre la dynamique des marqueurs tumoraux et explorer les thérapies ciblées dans le cancer colorectal.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.