Skip to content
LS174T
Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Documents

LS174T

Cell line · Product number 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים LS147T הוא וריאנט של LS-180, ושניהם נגזרים מאדנוקרצינומה מסוג B של המעי הגס מסוג Duke's, שנמצאה בחולה לבנה בת 58. קו התאים LS-180 המקורי הוקם על ידי תרבית של רקמת הגידול הקצוצה במשך 10 חודשים. LS-147T, יחד עם קו התאים המקורי, בולט בביטוי של מספר אונקוגנים, כולל myc, myb, ras ו-fos, בעוד שהוא שלילי לאחרים, כמו sis, abl ו-ros. קו זה מבטא גם רמות גבוהות של אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA), אינטרלוקין 6 (IL-6) ואינטרלוקין 10 (IL-10), שהם סמנים חשובים ויעדים פוטנציאליים במחקר סרטן המעי הגס.

תאים אלה מציגים מספר מאפיינים מרכזיים של תאי אפיתל המעי הגס, כולל מיקרו-וילי עשירים וואקואולות מוקין תוך-ציטופלזמטיות, המאפיינים בדרך כלל תאים מפרישים ברירית המעי הגס. מחקרים במיקרוסקופ אלקטרוני אישרו פרטים מבניים אלה, מה שמחזק עוד יותר את מקורם ואת מצב ההבחנה שלהם. חשוב לציין שתאי LS-147T הוכחו כגורמים לגידולים בעכברים חסרי מערכת חיסונית, ויוצרים גידולים באופן עקבי כאשר הם מוחדרים תת-עורית בצפיפות תאים גבוהה, מה שמאשר את הפוטנציאל הממאיר שלהם.

יתר על כן, קו התאים LS-147T הוא בעל ערך רב במחקרים המתמקדים בהיבטים המולקולריים והאימונולוגיים של סרטן המעי הגס. דווח כי קו זה קל יותר לתרבית משנה בהשוואה לקו האב שלו, LS-180, מה שהופך אותו לבחירה מעשית יותר למחקרים ארוכי טווח. הייצור המסיבי של CEA על ידי תאים אלה, שהוא גבוה משמעותית מזה של קווים מבוססים אחרים כמו HT-29, הופך את LS-147T למודל קריטי להבנת הדינמיקה של סמני הגידול ולחקר טיפולים ממוקדים בסרטן המעי הגס.

Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Karyotype
45,x עם כרומוזום x אחד חסר אך ללא חריגות כרומוזומליות אחרות

04Identifiers

Citation
LS174T (מספר קטלוגי Cytion 300392)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Expression and susceptibility

Protein expression
אנטיגן 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, ביטוי mRNA +
Antigen expression
HLA A2, B13, B50, סוג דם O
Isoenzymes
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Oncogenes
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutational profile
תאי LS-174T נושאים מוטציה בקודון 12 של הגן Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Reverse transcriptase
שלילי
Products
אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) 1944 ng/106 תאים ב-10 ימים, מוציין, אינטרלוקין-10 (IL-10), אינטרלוקין-6 (IL-6)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
5 עד 8 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
58 שנים
Ethnicity
קווקזי