Skip to content
LS174T
Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Documents

LS174T

Cell line · Product number 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào LS147T là một biến thể của LS-180, cả hai đều được phân lập từ khối u adenocarcinoma loại B của Duke ở ruột kết của một bệnh nhân nữ da trắng 58 tuổi. Dòng tế bào LS-180 ban đầu được thiết lập bằng cách nuôi cấy mô u đã được xay nhuyễn trong 10 tháng. LS-147T, cùng với dòng tế bào gốc của nó, nổi bật với việc biểu hiện nhiều gen ung thư bao gồm myc, myb, ras và fos, trong khi âm tính với các gen khác như sis, abl và ros. Dòng tế bào này cũng biểu hiện mức độ cao của kháng nguyên ung thư phôi (CEA), interleukin 6 (IL-6) và interleukin 10 (IL-10), là các dấu hiệu quan trọng và mục tiêu tiềm năng trong nghiên cứu ung thư đại tràng.

Các tế bào này thể hiện nhiều đặc điểm chính của tế bào biểu mô ruột kết, bao gồm vi lông phong phú và các túi mucin trong tế bào chất, những đặc điểm thường liên quan đến các tế bào tiết trong niêm mạc ruột kết. Các nghiên cứu bằng kính hiển vi điện tử đã xác nhận các chi tiết cấu trúc này, củng cố thêm nguồn gốc và trạng thái biệt hóa của chúng. Đặc biệt, các tế bào LS-147T đã được chứng minh là có khả năng gây ung thư ở chuột thiếu miễn dịch, liên tục tạo ra khối u khi được tiêm dưới da với mật độ tế bào cao, từ đó khẳng định tiềm năng ác tính của chúng.

Hơn nữa, dòng tế bào LS-147T đặc biệt có giá trị trong các nghiên cứu tập trung vào các khía cạnh phân tử và miễn dịch của ung thư đại trực tràng. Đã có báo cáo cho thấy dòng này dễ dàng hơn trong việc nuôi cấy so với dòng cha mẹ LS-180, khiến nó trở thành lựa chọn thực tiễn hơn cho các nghiên cứu dài hạn. Sản xuất CEA mạnh mẽ của các tế bào này, cao hơn đáng kể so với các dòng tế bào đã được thiết lập khác như HT-29, khiến LS-147T trở thành mô hình quan trọng để hiểu động học của các dấu hiệu ung thư và khám phá các liệu pháp nhắm mục tiêu trong ung thư đại trực tràng.

Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Synonyms
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude
Karyotype
45,x với một nhiễm sắc thể X bị thiếu nhưng không có bất kỳ rối loạn nhiễm sắc thể nào khác

04Identifiers

Citation
LS174T (Số catalog Cytion 300392)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Expression and susceptibility

Protein expression
Kháng nguyên đại tràng 3 dương tính, CEA dương tính, p53 âm tính, GFAP âm tính, biểu hiện mRNA dương tính
Antigen expression
HLA A2, B13, B50, Nhóm máu O
Isoenzymes
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Oncogenes
Myc dương tính, myb dương tính, ras dương tính, fos dương tính, p53 dương tính, sis âm tính, abl âm tính, ros âm tính, src âm tính
Mutational profile
Tế bào LS-174T mang đột biến tại codon 12 của gen Kras: GGT (Glycin tự nhiên) > GAT (Aspirin)
Reverse transcriptase
Tiêu cực
Products
Kháng nguyên ung thư phôi (CEA) 1944 ng/10⁶ tế bào trong 10 ngày, mucin, interleukin-10 (IL-10), interleukin-6 (IL-6)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
5 đến 8 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
58 năm
Ethnicity
Người da trắng