Skip to content
LS174T
Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Documents

LS174T

Cell line · Product number 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ LS147T เป็นสายพันธุ์หนึ่งของ LS-180 ซึ่งทั้งสองสายพันธุ์นี้มีต้นกำเนิดจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด adenocarcinoma ชนิด B ของลำไส้ใหญ่ในผู้ป่วยหญิงชาวผิวขาวอายุ 58 ปี เซลล์ไลน์ LS-180 ต้นฉบับถูกสร้างขึ้นโดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อมะเร็งที่บดละเอียดเป็นเวลา 10 เดือนLS-147T พร้อมกับสายพันธุ์แม่ของมัน มีความโดดเด่นในการแสดงออกของยีนก่อมะเร็งหลายชนิดรวมถึง myc, myb, ras และ fos ในขณะที่แสดงผลลบสำหรับยีนอื่นๆ เช่น sis, abl และ rosสายนี้ยังแสดงระดับสูงของแอนติเจนคาร์ซิโนเอ็มบริโอนิก (CEA), อินเตอร์ลิวคิน 6 (IL-6) และอินเตอร์ลิวคิน 10 (IL-10) ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ที่สำคัญและเป้าหมายที่เป็นไปได้ในการวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะสำคัญหลายประการของเซลล์เยื่อบุผิวลำไส้ใหญ่ รวมถึงไมโครวิลไลจำนวนมากและถุงน้ำมูกในไซโตพลาซึม ซึ่งเป็นลักษณะที่มักพบในเซลล์ที่มีหน้าที่สร้างสารคัดหลั่งในเยื่อบุลำไส้ใหญ่ การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนได้ยืนยันรายละเอียดโครงสร้างเหล่านี้ ซึ่งสนับสนุนเพิ่มเติมเกี่ยวกับต้นกำเนิดและสถานะการแยกแยะของเซลล์เหล่านี้ที่สำคัญคือ เซลล์ LS-147T ได้ถูกแสดงให้เห็นว่าสามารถก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่มีระบบภูมิคุ้มกันบกพร่อง โดยสามารถสร้างเนื้องอกได้สม่ำเสมอเมื่อฉีดเข้าไปใต้ผิวหนังในความหนาแน่นของเซลล์สูง ซึ่งยืนยันถึงศักยภาพในการเป็นมะเร็งของเซลล์เหล่านี้

นอกจากนี้ สายเซลล์ LS-147T ยังมีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาที่มุ่งเน้นด้านโมเลกุลและภูมิคุ้มกันของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก มีรายงานว่าสายเซลล์นี้สามารถเพาะเลี้ยงต่อได้ง่ายกว่าสายต้นกำเนิด LS-180 ทำให้เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมกว่าสำหรับการศึกษาในระยะยาวการผลิต CEA อย่างมีประสิทธิภาพโดยเซลล์เหล่านี้ ซึ่งสูงกว่าสายพันธุ์ที่ได้รับการยอมรับอื่น ๆ อย่าง HT-29 อย่างมีนัยสำคัญ ทำให้ LS-147T เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการเข้าใจพลวัตของตัวบ่งชี้เนื้องอก และการค้นหาการรักษาแบบเป้าหมายในโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
Karyotype
45,x โดยมีโครโมโซม x ขาดไปหนึ่งตัว แต่ไม่มีความผิดปกติของโครโมโซมอื่น

04Identifiers

Citation
LS174T (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300392)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Expression and susceptibility

Protein expression
โคลอนแอนติเจน 3 บวก, ซีอีเอ บวก, พี53 ลบ, จีเอฟเอพี ลบ, เอ็มอาร์เอ็นเอ เอ็กซ์เพรสชั่น บวก
Antigen expression
HLA A2, B13, B50, กรุ๊ปเลือด O
Isoenzymes
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Oncogenes
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutational profile
เซลล์ LS-174T มีการกลายพันธุ์ในโคดอนที่ตำแหน่ง 12 ของยีน Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
แอนติเจนคาร์ซิโนเอ็มบริโอนิก (CEA) 1944 นาโนกรัม/10^6 เซลล์ ใน 10 วัน, มิวซิน, อินเตอร์ลิวคิน-10 (IL-10), อินเตอร์ลิวคิน-6 (IL-6)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
5 ถึง 8 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
58 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน