LS174T

A linhagem celular LS147T é uma variante da LS-180; ambas são derivadas de um adenocarcinoma de cólon do tipo B de Duke, proveniente de uma paciente branca de 58 anos. A linhagem LS-180 original foi estabelecida por meio da cultura do tecido tumoral picado durante 10 meses. A LS-147T, assim como sua linha-mãe, destaca-se pela expressão de múltiplos oncogenes, incluindo myc, myb, ras e fos, ao mesmo tempo em que apresenta resultados negativos para outros, como sis, abl e ros. Essa linhagem também expressa altos níveis de antígeno carcinoembrionário (CEA), interleucina 6 (IL-6) e interleucina 10 (IL-10), que são marcadores importantes e alvos potenciais na pesquisa do câncer colorretal.

Essas células apresentam várias características-chave das células epiteliais do cólon, incluindo microvilosidades abundantes e vacúolos de mucina intracitoplasmáticos, que são características tipicamente associadas às células secretoras da mucosa colônica. Estudos de microscopia eletrônica confirmaram esses detalhes estruturais, reforçando ainda mais sua origem e estado de diferenciação. É importante ressaltar que as células LS-147T demonstraram ser tumorigênicas em camundongos imunodeprimidos, produzindo tumores de forma consistente quando inoculadas por via subcutânea em altas densidades celulares, confirmando assim seu potencial maligno.

Além disso, a linhagem celular LS-147T é particularmente valiosa em estudos focados nos aspectos moleculares e imunológicos do câncer colorretal. Foi relatado que essa linhagem é mais fácil de subcultivar em comparação com sua linhagem-mãe, a LS-180, tornando-a uma opção mais prática para estudos de longo prazo. A produção robusta de CEA por essas células, que é significativamente maior do que a de outras linhagens estabelecidas, como a HT-29, torna a LS-147T um modelo essencial para compreender a dinâmica dos marcadores tumorais e explorar terapias direcionadas no câncer colorretal.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.