- Tissue
- 冒號
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174
Documents
LS174T
Cell line · Product number 300392
The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...
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01General information
- Description
LS147T 細胞系是 LS-180 的變異株，兩者均源自一名 58 歲白人女性患者的杜克型 B 型結腸腺癌。原始的 LS-180 細胞系是透過將切碎的腫瘤組織培養 10 個月而建立的。 LS-147T 與其親本細胞系一樣，其顯著特徵在於表達多種致癌基因，包括 myc、myb、ras 和 fos，同時對 sis、abl 和 ros 等其他致癌基因呈陰性。 該細胞系亦高水平表達癌胚抗原（CEA）、白細胞介素 6（IL-6）及白細胞介素 10（IL-10），這些是結直腸癌研究中的重要標記物及潛在靶點。
這些細胞展現出結腸上皮細胞的若干關鍵特徵，包括豐富的微絨毛和細胞質內的黏蛋白空泡，這些特徵通常與結腸黏膜中的分泌細胞相關。電子顯微鏡研究已證實這些結構細節，進一步支持了其起源與分化狀態。 重要的是，研究顯示 LS-147T 細胞在免疫缺陷小鼠體內具有致瘤性，當以高細胞密度皮下接種時，能持續產生腫瘤，從而證實了其惡性潛能。
此外，LS-147T 細胞系在針對大腸直腸癌分子與免疫學層面的研究中具有特別重要的價值。已有報告指出，相較於其親本細胞系 LS-180，該細胞系更易於進行傳代培養，使其成為長期研究的更實用選擇。 這些細胞能大量產生 CEA，其產量顯著高於 HT-29 等其他已建立的細胞系，這使得 LS-147T 成為理解腫瘤標記物動態變化及探索大腸直腸癌標靶治療的關鍵模型。
- Tissue
- 冒號
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- Ls174T
- LS174t
- Ls-174-T
- LS-174-T
- LS 174 T
- LS174T
- Ls-174T
- LS 174T
- LS-174
- LS174
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的，在裸鼠身上
- Karyotype
- 45,x，缺失一條 X 染色體，但無其他染色體異常
04Identifiers
- Citation
- LS174T（Cytion 型號 300392）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1384
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- 結腸抗原 3 陽性、CEA 陽性、p53 陰性、GFAP 陰性、mRNA 表達陽性
- Antigen expression
- HLA A2、B13、B50，O型血
- Isoenzymes
- ADA，1：G6PD，B，PGM1，1，PGM3，2，PGD，A，ES-D，1，PEP-D，1
- Oncogenes
- Myc +、myb +、ras +、fos +、p53 +、sis -、abl -、ros -、src -
- Mutational profile
- LS-174T 細胞的 Kras 基因第 12 個密碼子攜帶一項突變：GGT（野生型 Gly）>GAT（Asp）
- Reverse transcriptase
- 否
- Products
- 癌胚抗原（CEA）10 天內達 1944 ng/106 個細胞，黏蛋白、白細胞介素-10（IL-10）、白細胞介素-6（IL-6）
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 5 至 8 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 58年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes