Skip to content
SUP-B15
Tissue
מח עצם
Disease
לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL)
Synonyms
Sup-B15, SUPB-15, SUPB15, SupB15, SupB15W, SupB15WT

Documents

SUP-B15

Cell line · Product number 305385

SUP-B15 is a human B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (BCP-ALL) cell line derived from the bone marrow of a child with Philadelphia chromosome-...

US$375.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

SUP-B15 הוא קו תאים של לוקמיה לימפובלסטית חריפה של תאי B קדומים (BCP-ALL) שמקורו במח העצם של ילד הסובל מ-ALL חיובי לכרומוזום פילדלפיה (Ph+). הוא מאופיין בנוכחות הגן הממוזג BCR-ABL1, הנובע מהטרנסלוקציה הכרומוזומלית t(9;22)(q34;q11), המהווה סימן היכר של לוקמיה לימפובלסטית חריפה מסוג B (Ph+ ALL). טרנסלוקציה זו מובילה לייצור של טירוזין קינאז BCR-ABL1 הפעיל באופן קבוע, המניע את תהליך היווצרות הלוקמיה על ידי עידוד התרבות בלתי מבוקרת ועיכוב אפופטוזיס. כתוצאה מכך, תאי SUP-B15 משמשים באופן נרחב במחקר על לוקמיה, במיוחד לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס לוקמיה לימפובלסטית חריפה מסוג ALL חיובי לכרומוזום פילדלפיה (Ph+) ולבדיקת מעכבי טירוזין קינאז (TKIs) כגון אימטיניב ודאסטיניב.

מחקרים הראו שתאי SUP-B15 מפגינים ביטוי-יתר של הגן MDM2, המווסת באופן שלילי את חלבון מדכא הגידול p53. ביטוי-יתר זה מתרחש למרות נוכחותו של p53 מסוג הבר, מה שמרמז כי השבתת p53 בתיווך MDM2 תורמת להישרדותם של תאי הלוקמיה. הפרעה בוויסות מסלול האיתות של p53 ב-SUP-B15 ובקווי תאים אחרים של BCP-ALL מדגישה נקודות תורפה טיפוליות פוטנציאליות, במיוחד עבור מעכבי MDM2 שמטרתם לשחזר את תפקוד ה-p53 ולעורר אפופטוזיס בתאי לוקמיה.

פרופיל גנומי וטרנסקריפטומי מקיף של SUP-B15 סיפק תובנות נוספות לגבי הנוף המולקולרי שלו. מחקרי ריצוף אקסום מלא ו-RNA זיהו מוטציות ודפוסי ביטוי גנים הקשורים להתקדמות הלוקמיה ולעמידות לתרופות. במסגרת ניתוחים פרמקוגנומיים, SUP-B15 נכלל במאמצי סינון רגישות לתרופות בקנה מידה גדול, כגון אלה שנערכו במסגרת "אנציקלופדיית קווי התאים הסרטניים" (CCLE). מחקרים אלה סייעו בהגדרת תגובתו לטיפולים ממוקדים שונים, לרבות מעכבי TKI ומעכבים אחרים המבוססים על מולקולות קטנות. בהתחשב ברקע הגנטי המאופיין היטב ובחשיבותו הקלינית, SUP-B15 נותר מודל חיוני למחקר פרה-קליני של לוקמיה ולפיתוח תרופות.

Tissue
מח עצם
Disease
לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL)
Applications
תרבות תאים תלת-ממדית, מחקר על הפרעות במערכת החיסון, אימונולוגיה
Synonyms
  • Sup-B15
  • SUPB-15
  • SUPB15
  • SupB15
  • SupB15W
  • SupB15WT

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
לימפוציט
Cell type
לימפוציט B
Karyotype
46, XY; קיימים הסמנים הבאים: t(9;22)(q34;q11), t(4;14) (p11;q24), der(4)t(1;4) (p11;q33), t(9;22) (q34;q11), der(10)t(3;10) (q25;q26), add(16); כרומוזום פילדלפיה קיים.
Doubling time
18 שעות

04Identifiers

Citation
SUP-B15 (מספר קטלוג Cytion 305385)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0103

05Expression and susceptibility

Protein expression
אימונוגלובולין (ציטופלזמי)
Antigen expression
CD1a -; CD2 -; CD3 -; CD4 -; CD5 -; CD8 -; CD10 +; CD13 +; CD38 +; CD71 +; HLA DR +
Mutational profile
מיזוג גנים: ABL1 + HGNC, HGNC:1014, BCR, שם/שמות=BCR-ABL1, BCR-ABL, הערה=אקסון 1 של BCR ממוזג עם אקסון 2 של ABL1 (טרנסקריפט e1a2)

06Handling and culture

Culture medium
IMDM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 3.024 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820800a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
יש להוסיף למדיום 20% FBS ו-0.05 מ"מ 2-מרקפטואתנול
Seeding density
2 עד 4 × 10⁵ תאים/מ"ל
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
8 שנים
Ethnicity
קווקזי