
- Tissue
- מח עצם
- Disease
- לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL)
- Synonyms
- Sup-B15, SUPB-15, SUPB15, SupB15, SupB15W, SupB15WT
Documents
SUP-B15
Cell line · Product number 305385
SUP-B15 is a human B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (BCP-ALL) cell line derived from the bone marrow of a child with Philadelphia chromosome-...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
SUP-B15 הוא קו תאים של לוקמיה לימפובלסטית חריפה של תאי B קדומים (BCP-ALL) שמקורו במח העצם של ילד הסובל מ-ALL חיובי לכרומוזום פילדלפיה (Ph+). הוא מאופיין בנוכחות הגן הממוזג BCR-ABL1, הנובע מהטרנסלוקציה הכרומוזומלית t(9;22)(q34;q11), המהווה סימן היכר של לוקמיה לימפובלסטית חריפה מסוג B (Ph+ ALL). טרנסלוקציה זו מובילה לייצור של טירוזין קינאז BCR-ABL1 הפעיל באופן קבוע, המניע את תהליך היווצרות הלוקמיה על ידי עידוד התרבות בלתי מבוקרת ועיכוב אפופטוזיס. כתוצאה מכך, תאי SUP-B15 משמשים באופן נרחב במחקר על לוקמיה, במיוחד לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס לוקמיה לימפובלסטית חריפה מסוג ALL חיובי לכרומוזום פילדלפיה (Ph+) ולבדיקת מעכבי טירוזין קינאז (TKIs) כגון אימטיניב ודאסטיניב.
מחקרים הראו שתאי SUP-B15 מפגינים ביטוי-יתר של הגן MDM2, המווסת באופן שלילי את חלבון מדכא הגידול p53. ביטוי-יתר זה מתרחש למרות נוכחותו של p53 מסוג הבר, מה שמרמז כי השבתת p53 בתיווך MDM2 תורמת להישרדותם של תאי הלוקמיה. הפרעה בוויסות מסלול האיתות של p53 ב-SUP-B15 ובקווי תאים אחרים של BCP-ALL מדגישה נקודות תורפה טיפוליות פוטנציאליות, במיוחד עבור מעכבי MDM2 שמטרתם לשחזר את תפקוד ה-p53 ולעורר אפופטוזיס בתאי לוקמיה.
פרופיל גנומי וטרנסקריפטומי מקיף של SUP-B15 סיפק תובנות נוספות לגבי הנוף המולקולרי שלו. מחקרי ריצוף אקסום מלא ו-RNA זיהו מוטציות ודפוסי ביטוי גנים הקשורים להתקדמות הלוקמיה ולעמידות לתרופות. במסגרת ניתוחים פרמקוגנומיים, SUP-B15 נכלל במאמצי סינון רגישות לתרופות בקנה מידה גדול, כגון אלה שנערכו במסגרת "אנציקלופדיית קווי התאים הסרטניים" (CCLE). מחקרים אלה סייעו בהגדרת תגובתו לטיפולים ממוקדים שונים, לרבות מעכבי TKI ומעכבים אחרים המבוססים על מולקולות קטנות. בהתחשב ברקע הגנטי המאופיין היטב ובחשיבותו הקלינית, SUP-B15 נותר מודל חיוני למחקר פרה-קליני של לוקמיה ולפיתוח תרופות.
- Tissue
- מח עצם
- Disease
- לוקמיה לימפובלסטית חריפה (ALL)
- Applications
- תרבות תאים תלת-ממדית, מחקר על הפרעות במערכת החיסון, אימונולוגיה
- Synonyms
- Sup-B15
- SUPB-15
- SUPB15
- SupB15
- SupB15W
- SupB15WT
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- לימפוציט
- Cell type
- לימפוציט B
- Karyotype
- 46, XY; קיימים הסמנים הבאים: t(9;22)(q34;q11), t(4;14) (p11;q24), der(4)t(1;4) (p11;q33), t(9;22) (q34;q11), der(10)t(3;10) (q25;q26), add(16); כרומוזום פילדלפיה קיים.
- Doubling time
- 18 שעות
04Identifiers
- Citation
- SUP-B15 (מספר קטלוג Cytion 305385)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0103
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- אימונוגלובולין (ציטופלזמי)
- Antigen expression
- CD1a -; CD2 -; CD3 -; CD4 -; CD5 -; CD8 -; CD10 +; CD13 +; CD38 +; CD71 +; HLA DR +
- Mutational profile
- מיזוג גנים: ABL1 + HGNC, HGNC:1014, BCR, שם/שמות=BCR-ABL1, BCR-ABL, הערה=אקסון 1 של BCR ממוזג עם אקסון 2 של ABL1 (טרנסקריפט e1a2)
06Handling and culture
- Culture medium
- IMDM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 3.024 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820800a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- יש להוסיף למדיום 20% FBS ו-0.05 מ"מ 2-מרקפטואתנול
- Seeding density
- 2 עד 4 × 10⁵ תאים/מ"ל
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 8 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes