SUP-B15

A SUP-B15 é uma linha celular de leucemia linfoblástica aguda de células B precursoras humanas (BCP-LLA) derivada da medula óssea de uma criança com LLA positiva para o cromossoma Filadélfia (Ph+). Caracteriza-se pela presença do gene de fusão BCR-ABL1, resultante da translocação cromossómica t(9;22)(q34;q11), que é uma característica distintiva da LLA Ph+. Esta translocação conduz à produção da tirosina quinase BCR-ABL1 constitutivamente ativa, impulsionando a leucemogénese ao promover a proliferação descontrolada e inibir a apoptose. Como resultado, a linha celular SUP-B15 tem sido amplamente utilizada na investigação sobre a leucemia, particularmente para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à LLA Ph+ e para testar inibidores da tirosina quinase (TKIs), tais como o imatinib e o dasatinib.

Estudos demonstraram que as células SUP-B15 apresentam sobreexpressão do gene MDM2, que regula negativamente a proteína supressora de tumores p53. Esta sobreexpressão ocorre apesar da presença de p53 de tipo selvagem, sugerindo que a inativação de p53 mediada por MDM2 contribui para a sobrevivência das células leucémicas. A desregulação da sinalização da p53 na SUP-B15 e noutras linhas celulares de LLA-BCP destaca potenciais vulnerabilidades terapêuticas, particularmente para inibidores de MDM2 que visam restaurar a função da p53 e induzir a apoptose nas células leucémicas.

A análise genómica e transcriptómica abrangente da SUP-B15 proporcionou novos insights sobre o seu panorama molecular. Estudos de sequenciação do exoma completo e do ARN identificaram mutações e padrões de expressão génica associados à progressão da leucemia e à resistência aos medicamentos. Nas análises farmacogenómicas, a SUP-B15 foi incluída em esforços de rastreio de sensibilidade a fármacos em grande escala, tais como os realizados na Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE). Estes estudos ajudaram a definir a sua capacidade de resposta a várias terapias direcionadas, incluindo TKIs e outros inibidores de moléculas pequenas. Dado o seu contexto genético bem caracterizado e a sua relevância clínica, a SUP-B15 continua a ser um modelo crucial para a investigação pré-clínica da leucemia e o desenvolvimento de fármacos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia