Tartalomra ugrás
SUP-B15
Szövet
Csontvelő
Betegség
Akut limfoblasztos leukémia (ALL)
Szinonimák
Sup-B15, SUPB-15, SUPB15, SupB15, SupB15W, SupB15WT

Dokumentumok

SUP-B15

Cell line · Termékszám 305385

SUP-B15 is a human B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (BCP-ALL) cell line derived from the bone marrow of a child with Philadelphia chromosome-...

€375.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A SUP-B15 egy humán B-sejt-elődsejtes akut limfoblasztos leukémia (BCP-ALL) sejtvonal, amelyet egy Philadelphia-kromoszóma-pozitív (Ph+) ALL-ben szenvedő gyermek csontvelőjéből nyertek. Jellemzője a BCR-ABL1 fúziós gén jelenléte, amely a t(9;22)(q34;q11) kromoszómális transzlokáció eredményeként jön létre, és amely a Ph+ ALL jellegzetes ismertetőjele. Ez a transzlokáció a konstitutív módon aktív BCR-ABL1 tirozin-kináz termelődéséhez vezet, amely az ellenőrizhetetlen proliferációt elősegítve és az apoptózist gátolva hajtja elő a leukemogenezist. Ennek eredményeként a SUP-B15-öt széles körben használják a leukémia-kutatásban, különösen a Ph+ ALL-t alapozó molekuláris mechanizmusok tanulmányozására, valamint olyan tirozin-kináz-gátlók (TKI-k) tesztelésére, mint az imatinib és a dasatinib.

Tanulmányok kimutatták, hogy a SUP-B15 sejtekben a MDM2 gén túltermelődik, amely negatívan szabályozza a p53 tumor-szupresszor fehérjét. Ez a túltermelés a vad típusú p53 jelenléte ellenére is bekövetkezik, ami arra utal, hogy a p53 MDM2 által közvetített inaktiválása hozzájárul a leukémiás sejtek túléléséhez. A p53-jelátvitel szabályozási zavara a SUP-B15-ben és más BCP-ALL sejtvonalakban potenciális terápiás sebezhetőségeket jelöl, különösen az olyan MDM2-gátlók esetében, amelyek célja a p53 funkciójának helyreállítása és az apoptózis kiváltása a leukémiás sejtekben.

A SUP-B15 átfogó genomikus és transzkriptomikus profilozása további betekintést nyújtott molekuláris jellemzőibe. A teljes exom- és RNS-szekvenálási vizsgálatok azonosították a leukémia progressziójával és a gyógyszerrezisztenciával összefüggő mutációkat és génexpressziós mintázatokat. A farmakogenomikai elemzések során a SUP-B15-öt bevonták olyan nagyszabású gyógyszerérzékenységi szűrési programokba, mint amilyeneket a Ráksejtvonal-enciklopédiában (CCLE) végeznek. Ezek a vizsgálatok segítettek meghatározni a sejtvonal reakcióképességét különböző célzott terápiákra, beleértve a TKI-kat és más kis molekulájú gátlókat. Jól jellemzett genetikai háttere és klinikai relevanciája miatt a SUP-B15 továbbra is kulcsfontosságú modell marad a preklinikai leukémia-kutatásban és a gyógyszerfejlesztésben.

Szövet
Csontvelő
Betegség
Akut limfoblasztos leukémia (ALL)
Alkalmazások
3D sejtkultúra, immunrendszeri betegségek kutatása, immunológia, immunrendszeri betegségek kutatása, immunológia
Szinonimák
  • Sup-B15
  • SUPB-15
  • SUPB15
  • SupB15
  • SupB15W
  • SupB15WT

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblasztok
Sejttípus
B lymphoblast
Kariotípus
46, XY; a következő markerek jelen vannak: t(9;22)(q34;q11), t(4;14) (p11;q24), der(4)t(1;4) (p11;q33), t(9;22) (q34;q11), der(10)t(3;10) (q25;q26), add(16); Philadelphia-kromoszóma jelen van.
Kettőzési idő
18 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
SUP-B15 (Cytion katalógusszám: 305385)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0103

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Immunglobulin (citoplazmatikus)
Antigén-expresszió
CD1a –; CD2 –; CD3 –; CD4 –; CD5 –; CD8 –; CD10+; CD13+; CD38+; CD71+; HLA DR+
Mutációs profil
Génfúzió: ABL1 + HGNC, HGNC:1014, BCR, Név(ek)=BCR-ABL1, BCR-ABL, Megjegyzés=A BCR 1. exonjának fúziója az ABL1 2. exonjával (e1a2 transzkript)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
IMDM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820800a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A tápközeget egészítsük ki 20%-os FBS-sel és 0,05 mM 2-merkaptoetanollal
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁵ sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
8 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi