Mine otse sisu juurde
SUP-B15
Kude
Luuüdi
Haigus
Äge lümfoblastiline leukeemia (ALL)
Sünonüümid
Sup-B15, SUPB-15, SUPB15, SupB15, SupB15W, SupB15WT

Dokumendid

SUP-B15

Cell line · Toote number 305385

SUP-B15 is a human B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (BCP-ALL) cell line derived from the bone marrow of a child with Philadelphia chromosome-...

€375.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SUP-B15 on inimese B-rakkude eellaste ägeda lümfoblastilise leukeemia (BCP-ALL) rakuliin, mis on saadud Philadelphia kromosoomi-positiivse (Ph+) ALL-iga lapse luuüdist. Seda iseloomustab BCR-ABL1-fusioonigeeni olemasolu, mis tuleneb t(9;22)(q34;q11) kromosoomide translokatsioonist, mis on Ph+ ALL-i tunnusmärk. See translokatsioon viib konstitutiivselt aktiivse BCR-ABL1 türosiinkinaasi tootmiseni, mis soodustab leukeemogeneesi, edendades kontrollimatut proliferatsiooni ja pärssides apoptoosi. Selle tulemusena on SUP-B15-i laialdaselt kasutatud leukeemia uurimisel, eelkõige Ph+ ALL-i aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks ning türosiinkinaasi inhibiitorite (TKI-de), nagu imatinib ja dasatinib, testimiseks.

Uuringud on näidanud, et SUP-B15 rakkudes esineb MDM2-geeni üleväljendamine, mis reguleerib negatiivselt kasvajavastast valku p53. See üleväljendamine toimub hoolimata loodusliku tüüpi p53 olemasolust, mis viitab sellele, et MDM2-vahendatud p53 inaktiveerimine soodustab leukeemiliste rakkude ellujäämist. p53 signaalimise deregulatsioon SUP-B15-s ja teistes BCP-ALL-rakuliinides toob esile potentsiaalsed terapeutilised nõrgad kohad, eriti MDM2-inhibiitorite puhul, mille eesmärk on taastada p53 funktsioon ja indutseerida apoptoosi leukeemilistes rakkudes.

SUP-B15 põhjalik genoomne ja transkriptomne profiilimine on andnud täiendavaid teadmisi selle molekulaarsest struktuurist. Kogu-eksoomi ja RNA sekveneerimise uuringud on tuvastanud mutatsioone ja geeniekspressiooni mustreid, mis on seotud leukeemia progresseerumise ja ravimresistentsusega. Farmakogenoomilistes analüüsides on SUP-B15 kaasatud ulatuslikesse ravimite tundlikkuse sõelumisprojektidesse, nagu näiteks need, mida viiakse läbi Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) raames. Need uuringud on aidanud määratleda selle vastuvõtlikkust erinevatele sihtterapiatele, sealhulgas TKI-dele ja muudele väikemolekulilistele inhibiitoritele. Arvestades selle hästi iseloomustatud geneetilist tausta ja kliinilist tähtsust, jääb SUP-B15 oluliseks mudeliks prekliinilises leukeemia-uuringutes ja ravimiarenduses.

Kude
Luuüdi
Haigus
Äge lümfoblastiline leukeemia (ALL)
Rakendused
3D rakukultuur, Immuunsüsteemi häirede uurimine, immunoloogia, immunoloogia
Sünonüümid
  • Sup-B15
  • SUPB-15
  • SUPB15
  • SupB15
  • SupB15W
  • SupB15WT

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid
Rakutüüp
B lümfoblast
Karyotüüp
46, XY; esinevad järgmised markerid: t(9;22)(q34;q11), t(4;14)(p11;q24), der(4)t(1;4)(p11;q33), t(9;22) (q34;q11), der(10)t(3;10) (q25;q26), add(16); esineb Philadelphias kromosoom.
Kahekordistumisaeg
18 tundi

04Tunnused

Viide
SUP-B15 (Cytioni katalooginumber 305385)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0103

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Immunoglobuliin (tsütoplasmaatiline)
Antigeeni ekspressioon
CD1a –; CD2 –; CD3 –; CD4 –; CD5 –; CD8 –; CD10+; CD13+; CD38+; CD71+; HLA DR+
Mutatsiooniprofiil
Geenifusioon: ABL1 + HGNC, HGNC:1014, BCR, nimetus(ed)=BCR-ABL1, BCR-ABL, märkus=BCR-i ekson 1 on ühinenud ABL1-i eksoniga 2 (e1a2 transkript)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 20% FBS-i ja 0,05 mM 2-merkaptoetanooli
Külvitihedus
2–4 × 10⁵ rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
8 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia