
- Tissue
- חלל הפה; לשון
- Disease
- קרצינומה של תאי קשקש בלשון
- Synonyms
- University of Western Ontario 23
Documents
01General information
- Description
קו התאים UWO23 (HPV33) נגזר מתאי הגידול של חולה גבר הסובל מסרטן הלשון, והוא בולט במיוחד בשל ביטויו של נגיף הפפילומה האנושי מסוג 33 (HPV33). תכונה ספציפית זו של UWO23 הופכת אותו למשאב חיוני למחקר על תפקידו האונקוגני של HPV בקרצינומה של תאי קשקש בראש ובצוואר (HNSCC). נוכחות HPV33 בתאים אלה מספקת הזדמנות ייחודית לחקור כיצד נגיף זה משפיע על תהליך הקרצינוגנזה, במיוחד בהקשר של אזורי הפה והלוע.
מחקרים המשתמשים בקו התאים UWO23 מתמקדים בחשיפת האינטראקציות המולקולריות והגנטיות המונעות על ידי HPV33, המובילות להתפתחות והתקדמות הסרטן. זה כולל מחקר של שינויים בוויסות מחזור התא, עמידות לאפופטוזיס ושינויים בהידבקות ובתנועתיות התאית, כולם גורמים מכריעים להבנת התנהגות הגידול והגרורות. בנוסף, קו התאים UWO23 מסייע בהערכת טיפולים תרופתיים חדשים וסמנים ביולוגיים אבחנתיים פוטנציאליים לסרטן הקשור ל-HPV. על ידי הבהרת המסלולים דרכם HPV33 תורם לממאירות, חוקרים יכולים לפתח טיפולים ממוקדים העשויים לשפר את תוצאות הטיפול בחולים הסובלים מסרטן הראש והצוואר הקשור ל-HPV.
- Tissue
- חלל הפה; לשון
- Disease
- קרצינומה של תאי קשקש בלשון
- Applications
- יצירת קווי תאים HNSCC חיוביים ל-HPV ועמידים לציספלטין, לצורך מחקר על עמידות לציספלטין בתאים חיוביים ל-HPV
- Synonyms
- University of Western Ontario 23
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Identifiers
- Citation
- UWO23 (מספר קטלוגי Cytion 300258)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7MF
04Expression and susceptibility
- Viruses
- טרנספורמנט: נגיף הפפילומה האנושי מסוג 33 (HPV33)
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 52 שנים
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes