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UWO23-Zellen
Gewebe
Mundhöhle; Zunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der oralen Zunge
Synonyme
University of Western Ontario 23

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UWO23-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300258

Die Zelllinie UWO23 (HPV33) stammt aus den Tumorzellen eines männlichen Patienten mit Zungenkrebs und zeichnet sich insbesondere durch die Expression von Hu... aus.

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie UWO23 (HPV33) stammt von den Tumorzellen eines männlichen Patienten mit oralem Zungenkrebs und zeichnet sich besonders durch die Expression des humanen Papillomavirus Typ 33 (HPV33) aus. Diese Besonderheit von UWO23 macht sie zu einer wichtigen Ressource für die Erforschung der onkogenen Rolle von HPV bei Plattenepithelkarzinomen im Kopf- und Halsbereich (HNSCC). Das Vorhandensein von HPV33 in diesen Zellen bietet eine einzigartige Gelegenheit zu erforschen, wie dieses Virus den Karzinogeneseprozess beeinflusst, insbesondere im Zusammenhang mit oralen und oropharyngealen Regionen.

Die Forschung mit der UWO23-Zelllinie konzentriert sich auf die Aufdeckung der molekularen und genetischen Interaktionen, die durch HPV33 angetrieben werden und zur Entwicklung und zum Fortschreiten von Krebs führen. Dazu gehört die Untersuchung von Veränderungen in der Zellzyklusregulierung, der Apoptoseresistenz und von Veränderungen in der zellulären Adhäsion und Motilität, die alle für das Verständnis des Tumorverhaltens und der Metastasierung entscheidend sind. Darüber hinaus ist die UWO23-Zelllinie von entscheidender Bedeutung für die Evaluierung neuer pharmakologischer Behandlungen und potenzieller diagnostischer Biomarker für HPV-bedingte Krebserkrankungen. Durch die Aufklärung der Wege, über die HPV33 zur Bösartigkeit beiträgt, können Forscher gezielte Therapien entwickeln, die die Behandlungsergebnisse für Patienten mit HPV-assoziierten Kopf- und Halskrebserkrankungen verbessern könnten.

Gewebe
Mundhöhle; Zunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der oralen Zunge
Anwendungen
Erzeugung von Cisplatin-resistenten HPV-positiven HNSCC-Zelllinien zur Untersuchung der Cisplatin-Resistenz bei HPV-positiven Zellen
Synonyme
  • University of Western Ontario 23

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Bezeichner

Quellenangabe
UWO23 (Cytion Katalognummer 300258)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MF

04Expression und Anfälligkeit

Viren
Transformant: Humanes Papillomavirus Typ 33 (HPV33)

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
52 Jahre