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UWO23 Cellule
Tessuto
Cavità orale; lingua
Malattia
Carcinoma a cellule squamose della lingua orale
Sinonimi
University of Western Ontario 23

Documenti

UWO23 Cellule

Cell line · Codice prodotto 300258

La linea cellulare UWO23 (HPV33) deriva dalle cellule tumorali di un paziente di sesso maschile affetto da carcinoma della lingua ed è particolarmente nota per l'espressione di Hu...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare UWO23 (HPV33) deriva dalle cellule tumorali di un paziente maschio affetto da carcinoma orale della lingua e si distingue in particolare per l'espressione del Papillomavirus umano di tipo 33 (HPV33). Questa caratteristica specifica di UWO23 la rende una risorsa fondamentale per la ricerca sul ruolo oncogenico di HPV nel carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). La presenza di HPV33 in queste cellule offre un'opportunità unica per esplorare come questo virus influenzi il processo di carcinogenesi, in particolare nel contesto delle regioni orali e orofaringee.

La ricerca che utilizza la linea cellulare UWO23 si concentra sulla scoperta delle interazioni molecolari e genetiche guidate dall'HPV33 che portano allo sviluppo e alla progressione del cancro. Ciò include lo studio delle alterazioni nella regolazione del ciclo cellulare, della resistenza all'apoptosi e dei cambiamenti nell'adesione e nella motilità cellulare, tutti elementi cruciali per la comprensione del comportamento tumorale e delle metastasi. Inoltre, la linea cellulare UWO23 è fondamentale per la valutazione di nuovi trattamenti farmacologici e potenziali biomarcatori diagnostici per i tumori legati all'HPV. Chiarendo le vie attraverso le quali l'HPV33 contribuisce alla malignità, i ricercatori possono sviluppare terapie mirate che potrebbero migliorare i risultati terapeutici per i pazienti affetti da tumori della testa e del collo associati all'HPV.

Tessuto
Cavità orale; lingua
Malattia
Carcinoma a cellule squamose della lingua orale
Applicazioni
Generazione di linee cellulari HNSCC HPV-positive resistenti al cisplatino per studiare la resistenza al cisplatino nelle cellule HPV-positive
Sinonimi
  • University of Western Ontario 23

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Identificatori

Riferimento bibliografico
UWO23 (numero di catalogo Cytion 300258)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MF

04Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: papillomavirus umano di tipo 33 (HPV33)

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
52 anni