MKN-74

A linhagem celular MKN-74 é derivada de um carcinoma gástrico humano e faz parte da série de linhagens celulares MKN, desenvolvidas para estudar diversos aspectos do câncer gástrico. Especificamente, a MKN-74 foi estabelecida a partir de um adenocarcinoma gástrico pouco diferenciado, um tipo de câncer gástrico conhecido por sua natureza agressiva e mau prognóstico. Essa linha celular é particularmente útil para pesquisas voltadas à compreensão dos mecanismos moleculares que impulsionam a progressão tumoral, a invasão e a metástase em cânceres gástricos pouco diferenciados.

As células MKN-74 apresentam morfologia epitelial e são conhecidas por crescerem em monocamadas. Elas são caracterizadas por sua alta capacidade proliferativa e pela habilidade de formar colônias em ágar mole, indicando um forte potencial de crescimento independente de ancoragem, uma característica marcante da malignidade. Essa linhagem celular também é valiosa para o estudo das vias de sinalização envolvidas no câncer gástrico, particularmente aquelas relacionadas à proliferação celular, sobrevivência e resistência à quimioterapia. Além disso, as células MKN-74 têm sido utilizadas em modelos de xenoenxertos para investigar o crescimento tumoral e a resposta a agentes terapêuticos, tornando-as uma ferramenta importante no desenvolvimento pré-clínico de medicamentos e na pesquisa sobre o câncer.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.