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MKN-74
Pañuelo de papel
Estómago
Enfermedad
Adenocarcinoma tubular gástrico
Lugar de metástasis
Hígado
Sinónimos
MKN74, MKN 74

Documentos

MKN-74

Cell line · Número de producto 300490

The MKN-74 cell line is derived from human gastric carcinoma and is part of the MKN series of cell lines, which were developed to study various aspects of...

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Personalización / Recomendaciones

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Recomendado (lote más fresco)
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1

01Información general

Descripción

La línea celular MKN-74 procede de un carcinoma gástrico humano y forma parte de la serie de líneas celulares MKN, desarrolladas para estudiar diversos aspectos del cáncer gástrico. En concreto, MKN-74 se estableció a partir de un adenocarcinoma de estómago poco diferenciado, un tipo de cáncer gástrico conocido por su naturaleza agresiva y su mal pronóstico. Esta línea celular es particularmente útil para la investigación centrada en la comprensión de los mecanismos moleculares que impulsan la progresión tumoral, la invasión y la metástasis en los cánceres gástricos poco diferenciados.

Las células MKN-74 presentan una morfología epitelial y se sabe que crecen en monocapas. Se caracterizan por su elevada capacidad proliferativa y su habilidad para formar colonias en agar blando, lo que indica un fuerte potencial de crecimiento independiente del anclaje, un sello distintivo de la malignidad. Esta línea celular también es valiosa para estudiar las vías de señalización implicadas en el cáncer gástrico, en particular las relacionadas con la proliferación celular, la supervivencia y la resistencia a la quimioterapia. Además, las células MKN-74 se han utilizado en modelos de xenoinjerto para investigar el crecimiento tumoral y la respuesta a agentes terapéuticos, lo que las convierte en una herramienta importante en el desarrollo preclínico de fármacos y la investigación oncológica.

Pañuelo de papel
Estómago
Enfermedad
Adenocarcinoma tubular gástrico
Lugar de metástasis
Hígado
Sinónimos
  • MKN74
  • MKN 74

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente

03Identificadores

Referencia
MKN-74 (número de catálogo 300490 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2791

04Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

06Donante

Edad del donante
62 años
Origen étnico
Asia Oriental