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MKN-74
Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma tubular gástrico
Local da metástase
Fígado
Sinónimos
MKN74, MKN 74

Documentos

MKN-74

Cell line · Número do produto 300490

The MKN-74 cell line is derived from human gastric carcinoma and is part of the MKN series of cell lines, which were developed to study various aspects of...

€500.00sem impostos nem portes de envio

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Recomendado (lote mais recente)
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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular MKN-74 é derivada do carcinoma gástrico humano e faz parte da série MKN de linhas celulares, que foram desenvolvidas para estudar vários aspectos do cancro gástrico. Especificamente, a MKN-74 foi criada a partir de um adenocarcinoma pouco diferenciado do estômago, um tipo de cancro gástrico conhecido pela sua natureza agressiva e mau prognóstico. Esta linha celular é particularmente útil para a investigação centrada na compreensão dos mecanismos moleculares que conduzem à progressão, invasão e metástase do tumor em cancros gástricos pouco diferenciados.

As células MKN-74 apresentam uma morfologia epitelial e são conhecidas por crescerem em monocamadas. Caracterizam-se pela sua elevada capacidade proliferativa e pela capacidade de formar colónias em ágar macio, o que indica um forte potencial de crescimento independente da ancoragem, uma caraterística distintiva da malignidade. Esta linha celular é também valiosa para o estudo das vias de sinalização envolvidas no cancro gástrico, particularmente as relacionadas com a proliferação celular, a sobrevivência e a resistência à quimioterapia. Além disso, as células MKN-74 têm sido utilizadas em modelos de xenoenxerto para investigar o crescimento tumoral e a resposta a agentes terapêuticos, o que as torna uma ferramenta importante no desenvolvimento pré-clínico de medicamentos e na investigação do cancro.

Tecido
Estômago
Doença
Adenocarcinoma tubular gástrico
Local da metástase
Fígado
Sinónimos
  • MKN74
  • MKN 74

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente

03Identificadores

Referência
MKN-74 (número de catálogo Cytion 300490)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2791

04Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

06Doador

Idade do dador
62 anos
Etnia
Ásia Oriental