Pāriet uz saturu
MKN-74
Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa kanāliņu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
MKN74, MKN 74

Dokumenti

MKN-74

Cell line · Preces numurs 300490

The MKN-74 cell line is derived from human gastric carcinoma and is part of the MKN series of cell lines, which were developed to study various aspects of...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MKN-74 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka kuņģa karcinomas un ir daļa no MKN šūnu līniju sērijas, kas tika izstrādāta, lai pētītu dažādus kuņģa vēža aspektus. Konkrēti, MKN-74 tika izveidota no slikti diferencētas kuņģa adenokarcinomas, kuņģa vēža veida, kas pazīstams ar savu agresīvo raksturu un slikto prognozi. Šī šūnu līnija ir īpaši noderīga pētījumiem, kas vērsti uz to, lai izprastu molekulāros mehānismus, kas nosaka audzēja progresēšanu, invaziju un metastāžu veidošanos slikti diferencēta kuņģa vēža gadījumā.

MKN-74 šūnām piemīt epitēlija morfoloģija, un tās aug monoslānī. Tām ir raksturīga augsta proliferācijas spēja un spēja veidot kolonijas mīkstā agārā, kas norāda uz spēcīgu no enkura neatkarīgu augšanas potenciālu, kas ir ļaundabīguma pazīme. Šī šūnu līnija ir arī vērtīga, lai pētītu kuņģa vēža signālu ceļus, jo īpaši tos, kas saistīti ar šūnu proliferāciju, izdzīvošanu un rezistenci pret ķīmijterapiju. Turklāt MKN-74 šūnas ir izmantotas ksenogrāfta modeļos, lai pētītu audzēja augšanu un reakciju uz terapeitiskiem līdzekļiem, tādējādi tās ir svarīgs instruments preklīniskajā zāļu izstrādē un vēža pētniecībā.

Audums
Kuņģis
Slimība
Kuņģa kanāliņu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Aknas
Sinonīmi
  • MKN74
  • MKN 74

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs

03Identifikatori

Atsauce
MKN-74 (Cytion kataloga numurs 300490)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_2791

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
62 gadi
Etniskā piederība
Austrumāzijas