Přejít na obsah
MKN-74
Tkáň
Žaludek
Nemoc
Tubulární adenokarcinom žaludku
Místo metastázy
Játra
Synonyma
MKN74, MKN 74

Dokumenty

MKN-74

Cell line · Číslo výrobku 300490

The MKN-74 cell line is derived from human gastric carcinoma and is part of the MKN series of cell lines, which were developed to study various aspects of...

€500.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MKN-74 pochází z lidského karcinomu žaludku a je součástí řady buněčných linií MKN, které byly vyvinuty ke studiu různých aspektů rakoviny žaludku. Konkrétně MKN-74 byla vytvořena ze špatně diferencovaného adenokarcinomu žaludku, což je typ karcinomu žaludku známý svou agresivní povahou a špatnou prognózou. Tato buněčná linie je zvláště užitečná pro výzkum zaměřený na pochopení molekulárních mechanismů, které řídí progresi nádoru, invazi a metastazování u špatně diferencovaných karcinomů žaludku.

Buňky MKN-74 vykazují epiteliální morfologii a jsou známé tím, že rostou v monovrstvách. Vyznačují se vysokou proliferační schopností a schopností vytvářet kolonie v měkkém agaru, což svědčí o silném růstovém potenciálu nezávislém na ukotvení, který je charakteristickým znakem malignity. Tato buněčná linie je také cenná pro studium signálních drah zapojených do rakoviny žaludku, zejména těch, které souvisejí s buněčnou proliferací, přežíváním a odolností vůči chemoterapii. Kromě toho byly buňky MKN-74 použity v xenograftových modelech ke zkoumání růstu nádorů a reakce na terapeutické látky, což z nich činí důležitý nástroj v preklinickém vývoji léčiv a výzkumu rakoviny.

Tkáň
Žaludek
Nemoc
Tubulární adenokarcinom žaludku
Místo metastázy
Játra
Synonyma
  • MKN74
  • MKN 74

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec

03Identifikátory

Citace
MKN-74 (katalogové číslo Cytion 300490)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2791

04Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

06Dárce

Věk dárce
62 let
Etnická příslušnost
Východní Asie