VMRC-RCZ

A linhagem celular VMRC-RCZ é uma linhagem de carcinoma de células renais (CCR) humano estabelecida a partir de um paciente com câncer de rim do tipo de células claras. Ela foi derivada com o objetivo de investigar os fundamentos biológicos e genéticos da carcinogênese renal, particularmente no que diz respeito às anomalias cromossômicas e à progressão tumoral. A análise citogenética da VMRC-RCZ revelou a deleção do braço curto do cromossomo 9, especificamente na região 9p21-22. Essa deleção implica a perda de genes supressores de tumor essenciais, como o CDKN2A, que é comumente associado a várias neoplasias malignas e desempenha um papel na regulação do ciclo celular.

Em análises mais amplas do genoma do câncer, o VMRC-RCZ contribuiu para o mapeamento de deleções homozigotas em vários tipos de tumores. Esses estudos mostram que regiões como a 9p21 frequentemente apresentam instabilidade estrutural em linhagens celulares cancerosas, incluindo o VMRC-RCZ, sugerindo que deleções genômicas nessa região podem conferir uma vantagem seletiva de crescimento durante a evolução do tumor. Além disso, o VMRC-RCZ foi incorporado a plataformas de perfilagem genômica de alta resolução para a identificação sistemática de mutações relacionadas ao câncer e alterações no número de cópias, tornando-o um modelo valioso para o estudo da patogênese do CCR e para a exploração de possíveis vulnerabilidades terapêuticas em neoplasias malignas renais.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.