COS-1细胞：基因表达研究中的“主力军”

COS-1细胞系是一种源自猴肾组织的成纤维细胞样细胞，常被研究人员用于研究猴病毒SV40。这些细胞易于转染，常被用于制备重组蛋白，以开展各类生化、分子及细胞生物学实验。

COS-1细胞系：来源与基本信息

在开始任何细胞系相关工作之前，必须对该细胞系本身有基本的了解。这包括细胞的来源、分离方法及其特性等信息。在本节中，我们将深入探讨 COS-1 细胞的基础知识。

什么是 COS-1 细胞系？

COS-1细胞系由成纤维细胞样细胞组成，由J.W.F. Cowell及其同事于1981年首次建立。这些细胞是通过将一种名为CV-1的绿猴上皮细胞系与一种突变型猿病毒SV40进行转化而产生的。 随后，对建立的COS-1细胞系进行了全面表征，以恢复此前从SV40复制起始点中被删除的基因组区域。这些细胞表达大T抗原以及其他必要蛋白质，能够正确复制环状基因组（如质粒）。

Chlorocebus aethiops（非洲绿猴）

COS-1细胞具有成纤维细胞样形态，能附着于表面并呈单层铺展。目前尚未发现COS-1细胞系的已知基因变异。不过，另一相关细胞系COS-7同样源自CV-1细胞，并表现出类似的特性。

COS-1细胞的优缺点

COS-1细胞系具有独特的优势和局限性，我们将在下文中进行讨论。

优势

• 易于转染：COS-1细胞系可通过多种方法（包括物理和化学方法）轻松转染。
• 慢病毒制备：COS-1细胞系是制备高质量重组慢病毒颗粒的理想包装宿主，无需额外的纯化步骤。这些细胞能牢固地附着在塑料表面，从而防止含有病毒颗粒的转染上清液发生污染[1]。
• 基因表达：COS-1细胞系广泛用于瞬时和稳定表达分析研究，通过转染含有SV40复制起始点的环状质粒，可产生多种重组蛋白[2]。

局限性

• 非人源细胞系：由于 COS-1 细胞源自非人灵长类动物，该细胞系产生的重组蛋白仅适用于实验室实验，不建议用于人体。

COS-1细胞的研究应用

讨论细胞系时最重要的考量之一是其研究应用。本节将探讨 COS-1 细胞最突出的研究应用。

• 重组蛋白生产：COS-1细胞系被广泛用于通过瞬时或稳定转染含SV40复制起始点的环状载体来生产重组蛋白。 在最近的一项研究中，生物学家利用 COS-1 细胞系生产了马绒毛膜促性腺激素，这是一种用于生殖领域的重组生殖激素 [3]。同样，另一项研究利用 COS-1 细胞生产了针对特定类型流感病毒的重组鸡源化单克隆抗体 [4]。
• 类病毒颗粒的生产：COS-1细胞可作为包装宿主用于生产高质量的慢病毒，并可用于制备病毒疫苗。一项研究利用COS-1细胞系生产了无感染性但高度免疫原性的登革热病毒样颗粒，这些颗粒是有效的疫苗候选物[5]。

4. COS-1细胞：相关文献

关于 COS-1 细胞的一些重要文献包括：

• 利用 COS-1 细胞生产和纯化登革热病毒样颗粒：《Bio-Protocol》上的这篇论文阐述了利用 COS-1 细胞生产高免疫原性登革热病毒样颗粒的方法。
• 三种宿主系统中重组马绒毛膜促性腺激素的表达分析——大肠杆菌BL21C、Sf昆虫细胞裂解液和COS-1哺乳动物细胞： 在这项研究中，研究人员比较了包括COS-1哺乳动物细胞在内的不同表达系统中，重组生殖激素（如马绒毛膜促性腺激素）的制备及其翻译后修饰情况。
• 研究蜱媒黄病毒样颗粒作为基因治疗的递送系统：本研究利用COS-1细胞生产了蜱媒脑炎病毒（TBEV）样颗粒。这些颗粒被提议作为载体制送所需的复制子（即治疗性基因）。
• 制备针对H9N2禽流感病毒神经氨酸酶的重组鸡源化单克隆抗体：这篇发表在《AMB Express》期刊上的文章利用COS-1细胞生产了针对H9N2型禽流感病毒神经氨酸酶的重组鸡源化单克隆抗体。
• 哺乳动物细胞表达的人类Kv通道的无去污剂可溶化：本研究利用COS-1哺乳动物细胞系表达人类Kv通道，以进行一系列可溶化实验。

高密度和低密度的COS-1细胞

COS-1细胞系的资源，包括操作规程、视频等

细胞培养操作规程

• COS-1细胞培养：此链接包含有关COS-1细胞传代、冷冻和解冻的宝贵信息。
• COS-1 细胞：此链接包含关于 COS-1 细胞系的基本信息。

转染操作指南

以下是一些描述 COS-1 细胞转染方法的资源。

• COS-1细胞的瞬时转染：本文档包含COS-1细胞系的瞬时转染方案。

与 COS-1 细胞系相关的视频

以下视频资源可帮助您了解 COS-1 细胞的培养、维持和转染的一般信息。

• 细胞传代：本视频介绍了哺乳动物细胞系的基本培养方法。
• 冷冻贴壁细胞：本视频包含有关冷冻贴壁细胞系的信息。
• 转染方案：本视频展示了哺乳动物细胞的转染流程。

COS-1细胞的培养

特征

信息

倍增时间

约 48 小时

贴壁或悬浮

贴壁生长时在培养瓶表面形成单层

接种密度

2 至 4 × 10⁴ 细胞/cm²；贴壁细胞用 1× PBS 洗涤，用 Accutase 处理，离心，重悬，并分装至新培养瓶中

培养基

含10%胎牛血清（FBS）的杜尔贝科改良鹰氏培养基（DMEM）；培养基应每周更换2至3次

培养条件（温度、CO₂）

需使用含5% CO₂、温度37°C的加湿培养箱

储存

液氮气相中，温度低于-150°C

冷冻过程与培养基

使用CM-1或CM-ACF培养基，采用温度仅下降1 °C的慢速冷冻法

解冻过程

将冷冻细胞置于设定为37°C的水浴中，在快速振荡下孵育40-60秒以解冻。离心去除冷冻培养基，将沉淀物重新悬浮，并分装至装有新鲜培养基的培养瓶中。细胞贴壁约需24小时。

生物安全等级

建议将COS-1细胞的操作生物安全等级定为1级

希望本文提供的信息能充分帮助您开始使用 COS-1 细胞。如需在研究中使用该细胞系，请向我们订购。

参考文献

1. Smith, S.L. 和 T. Shioda，COS-1 猴肾上皮细胞作为包装宿主在小规模生产高质量重组慢病毒方面的优势。《病毒学方法杂志》，2009. 157(1): 47-54 页。
2. MacKenzie, C.J. 和 T. Shioda, 《COS-1 细胞作为 lentivirus 生产包装宿主》。《细胞生物学最新协议》，2011. 50(1): 第 26.7.1-26.7.15 页。
3. Bhardwaj, A. 等，三种宿主系统中重组马绒毛膜促性腺激素的表达分析：大肠杆菌BL21C、Sf昆虫细胞裂解液和COS-1哺乳动物细胞。《印度动物研究杂志》，2021. 55(1): 第40-45页。
4. Wang, F. 等，针对 H9N2 禽流感病毒神经氨酸酶的重组鸡源化单克隆抗体的制备。《AMB Express》，2020 年。10：第 1-7 页。
5. Galula, J.U.、G.-J.J. Chang 和 D.-Y. Chao，《利用 COS-1 细胞生产和纯化登革热病毒样颗粒》。 《Bio-protocol》，2019年，第9卷第12期：e3280-e3280页。