COS-1 細胞：基因表達研究中的細胞「主力」

COS-1 細胞系是一種源自猴腎組織的成纖維細胞樣細胞，常被研究人員用於研究猴病毒 SV40。這些細胞易於轉染，且常被用於製備重組蛋白，以進行各類生化、分子及細胞生物學實驗。

COS-1 細胞系：來源與基本資訊。

在開始任何與細胞系相關的工作之前，必須對該細胞系本身有基本的了解。這包括細胞的來源、分離方法及其特性等資訊。在本節中，我們將深入探討 COS-1 細胞的基礎知識。

何謂 COS-1 細胞系？

COS-1 細胞系由 J.W.F. Cowell 及其同事於 1981 年首次建立的成纖維細胞樣細胞組成。這些細胞是透過將一種名為 CV-1 的綠猴上皮細胞系，轉化為靈長類病毒 SV40 的突變型而產生的。 隨後，研究人員對建立的 COS-1 細胞系進行了徹底的特性分析，以重建先前從複製起始點中被刪除的 SV40 基因組區域。這些細胞會表達大 T 抗原，以及其他對於正確複製環狀基因組（例如質體）所必需的蛋白質。

Chlorocebus aethiops（非洲綠猴）

COS-1 細胞具有成纖維細胞般的形態，能附著於表面並呈單層狀擴散。目前尚無已知的 COS-1 細胞系基因變異。然而，另一相關細胞系 COS-7 同樣源自 CV-1 細胞，並呈現類似的特徵。

COS-1 細胞的優缺點

COS-1 細胞系具有獨特的優點與限制，我們將在下文進行探討。

優點

• 易於轉染：COS-1 細胞系可透過多種方法（包括物理與化學方法）輕鬆進行轉染。
• 慢病毒製備：COS-1 細胞系是合適的包裝宿主，可製備高品質的重組慢病毒顆粒，且無需額外的純化步驟。這些細胞會牢固地附著於塑膠表面，從而防止含有病毒顆粒的轉染上清液受到污染 [1]。
• 基因表達：COS-1 細胞系廣泛應用於暫時性與穩定性表達分析研究，可透過轉染含有 SV40 複製起始點的環狀質體，產生多種重組蛋白質 [2]。

限制

• 非人類細胞系：由於 COS-1 細胞源自非人類靈長類動物，因此由該細胞系所產生的重組蛋白僅適用於實驗室實驗，不建議用於人類。

COS-1 細胞的研究應用

討論細胞系時最關鍵的考量之一，便是其研究應用。本節將探討 COS-1 細胞最突出的研究應用。

• 重組蛋白質生產：COS-1 細胞系廣泛用於透過暫時性或穩定性轉染含有 SV40 複製起始點的環狀載體，來生產重組蛋白質。 在一項近期研究中，生物學家利用 COS-1 細胞系生產馬絨毛膜促性腺激素，這是一種用於生殖應用的重組生殖激素 [3]。同樣地，另一項研究則利用 COS-1 細胞生產針對特定類型流感病毒的重組雞源單克隆抗體 [4]。
• 類病毒顆粒的生產：COS-1 細胞可作為高品質慢病毒生產的包裝宿主，並可用於製備病毒疫苗。一項研究利用 COS-1 細胞系生產了非感染性但高度免疫原性的登革熱病毒樣顆粒，這些顆粒是有效的疫苗候選物 [5]。

4. COS-1 細胞：相關文獻

關於 COS-1 細胞的一些值得注意的文獻包括：

• 利用 COS-1 細胞生產與純化登革熱病毒樣顆粒：《Bio-Protocol》上的這篇論文闡述了如何利用 COS-1 細胞生產高度免疫原性的登革熱病毒樣顆粒。
• 三種宿主系統（大腸桿菌 BL21C、Sf 昆蟲細胞裂解液及 COS-1 哺乳動物細胞）中重組馬絨毛膜促性腺激素的表達分析： 在這項研究中，研究人員比較了在不同表達系統（包括 COS-1 哺乳動物細胞）中，一種重組生殖激素（例如馬絨毛膜促性腺激素）的生產及翻譯後修飾情況。
• 探究蜱媒黃病毒樣顆粒作為基因治療的遞送系統：本研究利用 COS-1 細胞生產蜱媒腦炎病毒（TBEV）樣顆粒。這些顆粒被提議作為載體，用以遞送所需的複製子（即治療性基因）。
• 製備針對 H9N2 禽流感病毒神經氨酸酶的重組雞源化單克隆抗體：這篇發表於《AMB Express》期刊的文章，利用 COS-1 細胞生產針對 H9N2 型禽流感病毒神經氨酸酶的重組雞源化單克隆抗體。
• 哺乳動物細胞中表達的人類 Kv 離子通道之無洗滌劑可溶化：本研究利用 COS-1 哺乳動物細胞系表達人類 Kv 離子通道，以進行一系列可溶化實驗。

高密度與低密度的 COS-1 細胞

COS-1 細胞系的相關資源，包括操作指南、影片等

細胞培養操作指南

• COS-1 細胞培養：此連結包含有關 COS-1 細胞分割、冷凍及解凍的寶貴資訊。
• COS-1 細胞：此連結包含有關 COS-1 細胞系的基本資訊。

轉染操作手冊

以下是一些描述 COS-1 細胞轉染方法的資源。

• COS-1 細胞的瞬時轉染：本文件包含 COS-1 細胞系的瞬時轉染操作流程。

與 COS-1 細胞系相關的影片

以下影片資源可協助您獲取有關 COS-1 細胞培養、維持及轉染的一般資訊。

• 細胞傳代：本影片探討哺乳動物細胞系的基本培養實務。
• 黏附性細胞的冷凍保存：這段影片包含有關冷凍保存黏附性細胞系的信息。
• 轉染操作流程：本影片展示哺乳動物細胞的轉染程序。

COS-1 細胞的培養

特性

資訊

倍增時間

約 48 小時

貼壁或懸浮生長

附著型細胞會在培養瓶表面形成單層生長

接種密度

2 至 4 × 10⁴ 細胞/cm²；貼壁細胞需以 1× PBS 洗滌，經 Accutase 處理後離心、重懸，並分注至新培養瓶中

生長培養基

含 10% 胎牛血清（FBS）的杜爾貝科改良鷹氏培養基（DMEM）；培養基應每週更換 2 至 3 次

培養條件（溫度、CO₂）

需使用濕度控制的培養箱，維持 5% CO₂ 及 37°C 溫度

儲存

於液態氮氣相中，溫度需低於 -150°C

冷凍程序與培養基

採用 CM-1 或 CM-ACF 培養基，以每次僅降低 1 °C 的速度進行緩慢冷凍

解凍程序

將冷凍細胞置於設定為 37°C 的水浴中，在快速攪拌下孵育 40-60 秒以進行解凍。將細胞離心以去除冷凍介質，將沉澱物重新懸浮，並分裝至裝有新鮮培養基的培養瓶中。細胞附著約需 24 小時。

生物安全等級

建議處理 COS-1 細胞時採用生物安全等級 1

我們希望本文提供的豐富資訊能協助您開始進行 COS-1 細胞相關研究。若您希望在研究中使用此細胞系，歡迎向我們訂購。

參考文獻

1. Smith, S.L. 及 T. Shioda，《COS-1 猴腎上皮細胞作為小規模生產高品質重組慢病毒包裝宿主的優勢》。《病毒學方法期刊》，2009 年，157(1)：第 47-54 頁。
2. MacKenzie, C.J. 與 T. Shioda，《COS-1 細胞作為生產慢病毒的包裝宿主》。《當代細胞生物學協議》，2011 年，50(1)：第 26.7.1–26.7.15 頁。
3. 巴爾德瓦傑（Bhardwaj），A. 等，三種宿主系統中重組馬絨毛膜促性腺激素的表達分析：大腸桿菌 BL21C、Sf 昆蟲細胞裂解液及 COS-1 哺乳動物細胞。《印度動物研究期刊》，2021。 55(1)：第 40-45 頁。
4. 王，F.等人，《針對H9N2禽流感病毒神經氨酸酶的重組雞源單克隆抗體的製備》。《AMB Express》，2020年。10期：第1-7頁。
5. Galula, J.U.、G.-J.J. Chang 及 D.-Y. Chao，《利用 COS-1 細胞生產與純化登革熱病毒樣顆粒》。 《Bio-protocol》，2019年，第9卷第12期：第e3280-e3280頁。