Премини към съдържанието
Hep-56.1C
Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином
Синоними
HEP-56.1C, 56.1C, 56.1c

Документи

Hep-56.1C

Cell line · Номер на продукта 400203

The Hep-56.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...

€800.00без ДДС и доставка
Наличността е ниска
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Хепатомната клетъчна линия Hep-56.1c е получена от тумор на черния дроб на мишка, по-специално от щама C57BL/6J. Тази клетъчна линия се характеризира със забележителна мутация в гена p53, установена на различни етапи по време на in vitro размножаването. По-конкретно, Hep-56.1c показва трансверсия от C:G до G:C в кодон 132 на екзон 5, което води до промяна на аминокиселината от цистеин в триптофан. Тази мутация е открита при пасаж номер 17, което предполага селективно предимство на растежа, предоставено от мутацията, водещо до нейното преобладаване в клетъчната популация.

Клетъчната линия Hep-56.1c показва предимно епителна морфология, което отразява нейния хепатоцитен произход. Това съответства на нейния профил на протеини от междинни нишки, който включва прости кератини К8 и К18, както и виментин и кератин К19 в различна степен. Наличието на тези протеини потвърждава хепатоцитната природа на клетъчната линия и класифицирането ѝ като хепатомна линия.

По-нататъшният анализ на Hep-56.1c с помощта на ДНК пръстови отпечатъци не разкрива някакви големи структурни аномалии, въпреки че се наблюдават някои промени в относителната интензивност на специфични ленти с увеличаване на броя на пасажите. Това показва геномна стабилност с известна степен на променливост през продължителни периоди на култивиране. Анализът на мутациите на p53 и моделите на експресия на протеини от междинни нишки заедно утвърждават Hep-56.1c като ценен модел за изучаване на хепатоцелуларния карцином и ролята на мутациите на p53 в туморогенезата на черния дроб.

Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином
Синоними
  • HEP-56.1C
  • 56.1C
  • 56.1c

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
Hep-56.1C (каталожен номер 400203 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_5768

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
C57BL/6J
Възраст на донора
Възрастни