Skip to content
Hep-56.1C
Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ
Synonyms
HEP-56.1C, 56.1C, 56.1c

Documents

Hep-56.1C

Cell line · Product number 400203

The Hep-56.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ Hep-56.1c hepatoma ได้มาจากเนื้องอกในตับของหนู โดยเฉพาะจากสายพันธุ์หนู C57BL/6J เซลล์ไลน์นี้มีลักษณะเด่นคือการกลายพันธุ์ในยีน p53 ซึ่งถูกระบุในหลายช่วงของการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองโดยเฉพาะอย่างยิ่ง Hep-56.1c แสดงการเปลี่ยนคู่เบสจาก C:G เป็น G:C ที่โคดอน 132 ของเอ็กซอน 5 ส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของกรดอะมิโนจากซิสเตอีนเป็นทริปโตเฟน การกลายพันธุ์นี้ตรวจพบที่จำนวนรุ่นที่ 17 ซึ่งบ่งชี้ว่ามีการได้เปรียบในการเจริญเติบโตแบบเลือกสรรที่เกิดจากกลายพันธุ์นี้ ส่งผลให้กลายพันธุ์นี้มีความโดดเด่นในประชากรเซลล์

เซลล์ไลน์ Hep-56.1c แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่เป็นเยื่อบุเป็นหลัก สะท้อนถึงต้นกำเนิดจากเซลล์ตับ ซึ่งสอดคล้องกับโปรไฟล์โปรตีนเส้นใยขนาดกลางที่มีทั้งเคอราติน K8 และ K18 รวมถึงวีเมนตินและเคอราติน K19 ในระดับที่แตกต่างกัน การมีอยู่ของโปรตีนเหล่านี้ยืนยันถึงลักษณะของเซลล์ไลน์ที่เป็นเซลล์ตับและการจัดประเภทเป็นเซลล์ไลน์มะเร็งตับ

การวิเคราะห์เพิ่มเติมของ Hep-56.1c โดยใช้การพิมพ์ลายนิ้วมือดีเอ็นเอไม่พบความผิดปกติทางโครงสร้างที่สำคัญใดๆ แม้ว่าจะมีการเปลี่ยนแปลงในความเข้มสัมพัทธ์ของแถบเฉพาะบางแถบเมื่อจำนวนครั้งที่ผ่านเพิ่มขึ้น สิ่งนี้บ่งชี้ถึงความเสถียรของจีโนมพร้อมกับความแปรปรวนในระดับหนึ่งในช่วงระยะเวลาการเพาะเลี้ยงที่ยาวนานการวิเคราะห์การกลายพันธุ์ของ p53 และรูปแบบการแสดงออกของโปรตีนไฟบริลชนิดกลางร่วมกันยืนยันว่า Hep-56.1c เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งตับชนิดเซลล์ตับและบทบาทของการกลายพันธุ์ของ p53 ในการเกิดเนื้องอกในตับ

Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับ
Synonyms
  • HEP-56.1C
  • 56.1C
  • 56.1c

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
Hep-56.1C (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400203)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5768

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
ทุก 3 ถึง 5 วัน
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J
Donor age
ผู้ใหญ่