Hep-56.1C

La linea cellulare di epatoma Hep-56.1c è derivata da un tumore epatico di topo, in particolare dal ceppo di topo C57BL/6J. Questa linea cellulare è caratterizzata da una notevole mutazione nel gene p53, identificata in diversi passaggi durante la propagazione in vitro. In particolare, Hep-56.1c presenta una transversione da C:G a G:C al codone 132 dell'esone 5, con conseguente cambio di aminoacido da cisteina a triptofano. Questa mutazione è stata rilevata al passaggio numero 17, suggerendo un vantaggio selettivo di crescita conferito dalla mutazione, che ha portato alla sua predominanza nella popolazione cellulare.

La linea cellulare Hep-56.1c mostra una morfologia prevalentemente epiteliale, che riflette la sua origine epatocitaria. Ciò è coerente con il profilo proteico del filamento intermedio, che comprende le cheratine semplici K8 e K18, nonché la vimentina e la cheratina K19 in misura variabile. La presenza di queste proteine conferma la natura epatocitaria della linea cellulare e la sua classificazione come linea di epatoma.

Un'ulteriore analisi di Hep-56.1c mediante DNA fingerprinting non ha rivelato alcuna anomalia strutturale di rilievo, sebbene siano stati osservati alcuni cambiamenti nell'intensità relativa di bande specifiche con l'aumento del numero di passaggi. Ciò indica una stabilità genomica con un certo grado di variabilità in periodi di coltura prolungati. L'analisi delle mutazioni di p53 e i modelli di espressione della proteina del filamento intermedio definiscono Hep-56.1c come un modello prezioso per lo studio del carcinoma epatocellulare e del ruolo delle mutazioni di p53 nella tumorigenesi epatica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia