Gå direkte til indholdet
Hep-56.1C
Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Synonymer
HEP-56.1C, 56.1C, 56.1c

Dokumenter

Hep-56.1C

Cell line · Varenummer 400203

The Hep-56.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...

€800.00ekskl. moms og fragt
Begrænset lagerbeholdning
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Hep-56.1c hepatomcellelinjen stammer fra en muselevertumor, specifikt fra C57BL/6J-musestammen. Denne cellelinje er kendetegnet ved en bemærkelsesværdig mutation i p53-genet, der er identificeret ved forskellige passager under in vitro-opformering. Specifikt udviser Hep-56.1c en C:G til G:C-transversion ved codon 132 i exon 5, hvilket resulterer i en aminosyreændring fra cystein til tryptofan. Denne mutation blev opdaget ved passage nummer 17, hvilket tyder på en selektiv vækstfordel, som mutationen giver, og som fører til dens dominans i cellepopulationen.

Hep-56.1c-cellelinjen har en overvejende epitelial morfologi, som afspejler dens hepatocytiske oprindelse. Dette er i overensstemmelse med dens intermediære filamentproteinprofil, som omfatter de simple keratiner K8 og K18 samt vimentin og keratin K19 i varierende grad. Tilstedeværelsen af disse proteiner bekræfter cellelinjens hepatocytiske natur og dens klassificering som en hepatomlinje.

Yderligere analyse af Hep-56.1c ved hjælp af DNA-fingeraftryk afslørede ingen større strukturelle abnormiteter, selvom der blev observeret nogle ændringer i de relative intensiteter af specifikke bånd med stigende antal passager. Dette indikerer genomisk stabilitet med en vis grad af variabilitet over længere dyrkningsperioder. Analysen af p53-mutationer og ekspressionsmønstre for intermediære filamentproteiner etablerer tilsammen Hep-56.1c som en værdifuld model til undersøgelse af hepatocellulært karcinom og p53-mutationers rolle i tumorgenese i leveren.

Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Synonymer
  • HEP-56.1C
  • 56.1C
  • 56.1c

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Hep-56.1C (Cytion katalognummer 400203)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5768

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Race / underart
C57BL/6J
Donorens alder
Voksen