Gå direkt till innehållet
Hep-56.1C
Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Synonymer
HEP-56.1C, 56.1C, 56.1c

Hep-56.1C

Cell line · Produktnummer 400203

The Hep-56.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Lågt lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Hepatomcellinjen Hep-56.1c härrör från en levertumör från en mus, specifikt från musstammen C57BL/6J. Denna cellinje kännetecknas av en anmärkningsvärd mutation i p53-genen, som identifierats vid olika passager under in vitro-förökning. Specifikt uppvisar Hep-56.1c en transversion från C:G till G:C vid kodon 132 i exon 5, vilket resulterar i en aminosyraförändring från cystein till tryptofan. Denna mutation upptäcktes vid passage nummer 17, vilket tyder på en selektiv tillväxtfördel som mutationen ger och som leder till att den dominerar i cellpopulationen.

Cellinjen Hep-56.1c uppvisar en övervägande epitelial morfologi, vilket återspeglar dess hepatocytiska ursprung. Detta överensstämmer med dess proteinprofil för intermediära filament, som inkluderar de enkla keratinerna K8 och K18, samt vimentin och keratin K19 i varierande grad. Förekomsten av dessa proteiner bekräftar cellinjens hepatocytiska karaktär och dess klassificering som en hepatomlinje.

Ytterligare analys av Hep-56.1c med hjälp av DNA-fingeravtryck avslöjade inga större strukturella avvikelser, även om vissa förändringar i de relativa intensiteterna för specifika band observerades med ökande passagenummer. Detta indikerar genomisk stabilitet med en viss grad av variabilitet under längre odlingsperioder. Analysen av p53-mutationer och uttrycksmönstren för intermediära filamentproteiner gör tillsammans Hep-56.1c till en värdefull modell för studier av hepatocellulärt karcinom och p53-mutationernas roll i tumörutvecklingen i levern.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Synonymer
  • HEP-56.1C
  • 56.1C
  • 56.1c

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
Hep-56.1C (Cytion katalognummer 400203)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5768

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Var 3:e till 5:e dag
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
C57BL/6J
Donatorns ålder
Vuxen