ETK-1

ETK-1 je lidská buněčná linie intrahepatálního cholangiokarcinomu (IHCCA), původně izolovaná z ascitické tekutiny dospělého pacienta se sarkomatoidním cholangiokarcinomem. Nádor, z něhož byla ETK-1 odvozena, vykazoval jak tubulární adenokarcinom, tak sarkomatoidní složky, přičemž buněčná linie odráží sarkomatoidní fenotyp. Buňky ETK-1 rostou adhezivně jako jednotná epiteliální monovrstva s dlažebkovitým vzhledem, složená převážně z malých polygonálních buněk s kulatými až oválnými jádry a výraznými jádřinci. Buňky v raných pasážích vykazovaly dobu zdvojnásobení populace přibližně 70 hodin a hyperdiploidní karyotyp s modálním počtem chromozomů v polovině 70. let, což odpovídá chromozomální nestabilitě typické pro agresivní zhoubné nádory žlučových cest.

Z imunofenotypického hlediska buňky ETK-1 exprimují markery žlučového epitelu, včetně γ-glutamyltranspeptidázy (GGT), cytokeratinu 18 (CK18) a cytokeratinu 19 (CK19), což potvrzuje jejich cholangioocytární původ. Za bazálních podmínek jsou negativní na markery asociované s hepatocyty, jako je alfa-fetoprotein (AFP) a albumin. Buňky ETK-1 exprimují vimentin, což odráží jejich sarkomatoidní charakteristiky a částečný mezenchymální fenotyp, zatímco neexprimují karcinoembryonální antigen (CEA) a sacharidový antigen 19-9 (CA19-9). Tento profil markerů odpovídá sarkomatoidní složce pozorované v primárním nádoru a zdůrazňuje rysy odpovídající vlastnostem podobným epiteliálně-mezenchymální transici.

ETK-1 se také používá jako model ke studiu buněčné plasticity a diferenciace buněčných linií u cholangiokarcinomu. Léčba inhibitorem DNA-methyltransferázy 5-azacytidinem vyvolala morfologické a fenotypové změny, což vedlo k vytvoření odvozené buněčné linie s vlastnostmi podobnými hepatocytům, včetně exprese AFP, albuminu, integrinu α1 a trombopoetinu, spolu se ztrátou určitých žlučových markerů. V modelech s xenotransplantáty tvoří neléčené buňky ETK-1 nádory odpovídající tubulárnímu adenokarcinomu vykazujícímu duktální fenotyp. Tyto nálezy dokazují, že ETK-1 si zachovává diferenciační plasticitu a slouží jako cenný in vitro systém pro zkoumání transdiferenciace žlučového epitelu na hepatocyty, epigenetické regulace a nádorové heterogenity u intrahepatálního cholangiokarcinomu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení