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OV-90
Gewebe
Metastasen
Krankheit
Adenokarzinom der Eierstöcke
Synonyme
OV90

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OV-90

Cell line · Artikelnummer 305849

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

OV-90 ist eine humane Zelllinie des epithelialen Ovarialkarzinoms (EOC), die aus malignem Aszites einer erwachsenen Patientin gewonnen wurde, die zuvor keine Chemo- oder Strahlentherapie erhalten hatte. Sie gehört zu einer Gruppe spontan immortalisierter Ovarialkarzinom-Zelllinien, die entwickelt wurden, um wichtige klinische und molekulare Merkmale der Tumoren, aus denen sie stammen, zu erhalten. OV-90 weist insbesondere ein aggressives In-vitro-Wachstumsverhalten auf, das mit seiner klinischen Herkunft von einer Patientin mit fortgeschrittener Erkrankung korreliert. Zytogenetisch tragen OV-90-Zellen Mutationen in Tumorsuppressorgenen und Onkogenen, die häufig bei Eierstockkrebs vorkommen, darunter TP53 und BRCA2, sowie Veränderungen im TGF-β-Rezeptor Typ II und CDKN2A. Diese Mutationen spiegeln die genomische Instabilität wider, die häufig bei hochgradigen serösen Ovarialkarzinomen beobachtet wird.

Die Erstellung von Genexpressionsprofilen von OV-90 zeigt eine ausgeprägte molekulare Signatur, die mit dem Ursprung des Tumors übereinstimmt. Vergleichende Microarray-Analysen haben gezeigt, dass das Transkriptom-Profil von OV-90 deutlich von dem des normalen Ovarialoberflächenepithels abweicht und eine starke Hochregulierung von Genen aufweist, die an der Proliferation, der Reaktion auf DNA-Schäden und der Invasion beteiligt sind. Darüber hinaus gruppiert sich OV-90 unter den untersuchten Ovarialkarzinomlinien eher mit anderen aggressiven Tumorlinien als mit solchen, die von indolenten Erkrankungen stammen, was es zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der Biologie von Hochrisikoerkrankungen macht. Seine Expressionsmuster stimmen auch mit klinischen Markern für eine schlechte Prognose überein, was seine Nützlichkeit in der präklinischen Forschung mit Schwerpunkt auf aggressiven Subtypen von Eierstockkrebs weiter unterstützt.

In systembiologischen und pharmakogenomischen Studien wurde OV-90 in groß angelegte transkriptomische und proteomische Analysen einbezogen, darunter die Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) und proteomische Atlanten. Diese Datensätze offenbaren Veränderungen der Kopienzahl und der Genexpression, die mit der Empfindlichkeit gegenüber Medikamenten korreliert werden können, insbesondere gegenüber Wirkstoffen, die auf DNA-Reparaturwege oder Zellzyklusregulatoren abzielen. Die Verfügbarkeit dieser umfassenden multiautomatischen Daten sowie die phänotypische und genetische Übereinstimmung des OV-90 mit dem aggressiven Ovarialkarzinom unterstreichen seinen Wert für die Arzneimittelentwicklung, die Entdeckung von Biomarkern und die mechanistische Untersuchung der Pathogenese des Ovarialkarzinoms.

Gewebe
Metastasen
Krankheit
Adenokarzinom der Eierstöcke
Synonyme
  • OV90

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Epithelial
Tumorauslösend
Ja; Ja, die Zellen sind in Nacktmäusen tumorbildend und bilden Kolonien in Weichagar
Karyotyp
46, XX, der(1)t(1;10)(p36;p15), hsr(3)(p11), der(9;17)(q10;q10), der(10)t(10;17)(p15;p12p13), der(13)t(13;13)(p11;q14)
Verdopplungszeit
1,5 Tage

04Bezeichner

Quellenangabe
OV-90 (Cytion-Katalognummer 305849)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_3768

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Keratin
Onkogene
Her2/neu+; p53 (mutiert, Ser --> Arg-Mutation an Exon 6, Codon 215)
Mutationsprofil
Mutation: Genfusion, CDKN2D + HGNC, WDF Jahre2, Name(n)=CDKN2D-WDF Jahre2. Mutation, SMAD4, Einfach, p.Arg445Ter (c.1333C>T), Homozygot. Mutation, TP53, Einfach, p.Ser215Arg (c.643A>C), Homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Medium 199, w: 2,7 mM stabiles Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820101a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 15% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
64 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch