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CCD-1095Sk
Gewebe
Haut
Krankheit
Duktales Karzinom
Synonyme
CCD1095Sk

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CCD-1095Sk

Cell line · Artikelnummer 300642

CCD-1095Sk is a fibroblast cell line derived from the skin of a human male. It was established from a biopsy of uninvolved skin taken from a patient who h...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

CCD-1095Sk ist eine Fibroblasten-Zelllinie, die von der Haut eines männlichen Menschen stammt. Sie wurde aus einer Biopsie unbeteiligter Haut von einem Patienten mit einem Plattenepithelkarzinom gewonnen. Diese Zelllinie wird vor allem in Studien verwendet, die die Wechselwirkungen zwischen Hautzellen und Krebszellen untersuchen, insbesondere wie nicht-kanzeröse Zellen in der Mikroumgebung des Tumors das Wachstum und die Progression des Tumors beeinflussen können. Die CCD-1095Sk-Zelllinie ist daher wertvoll für die Krebsforschung, insbesondere für das Verständnis der stromalen Aspekte von Hautkrebs.

Die CCD-1095Sk-Zellen weisen eine Fibroblastenmorphologie auf, die durch eine spindelförmige, längliche Form gekennzeichnet ist, die typisch für Bindegewebszellen ist, die extrazelluläre Matrixkomponenten produzieren, die für die Gewebereparatur und strukturelle Integrität wichtig sind. Diese Zellen sind adhärent, wachsen in Monolayern und sind für ihre Robustheit unter verschiedenen experimentellen In-vitro-Bedingungen bekannt. Sie werden verwendet, um das Fibroblastenverhalten in normaler Haut zu modellieren und um Veränderungen der Fibroblastenaktivität unter Krebsbedingungen zu untersuchen, wozu auch die Sekretion von Wachstumsfaktoren, Zytokinen und Matrixmetalloproteinasen gehören kann. Als solche sind sie ein unschätzbares Instrument für pharmakologische Studien und die Entwicklung therapeutischer Strategien, die auf die Tumorumgebung abzielen.

Gewebe
Haut
Krankheit
Duktales Karzinom
Anwendungen
3D-Zellkultur
Synonyme
  • CCD1095Sk

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
CCD-1095Sk (Cytion Katalognummer 300642)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2344

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
37 Jahre