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CCD-1095Sk
Tessuto
La pelle
Malattia
Carcinoma duttale
Sinonimi
CCD1095Sk

Documenti

CCD-1095Sk

Cell line · Codice prodotto 300642

CCD-1095Sk is a fibroblast cell line derived from the skin of a human male. It was established from a biopsy of uninvolved skin taken from a patient who h...

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01Informazioni generali

Descrizione

CCD-1095Sk è una linea cellulare di fibroblasti derivata dalla pelle di un uomo. È stata ottenuta da una biopsia di pelle non coinvolta prelevata da un paziente affetto da carcinoma a cellule squamose. Questa linea cellulare viene utilizzata principalmente in studi che esplorano le interazioni tra le cellule della pelle e le cellule cancerose, in particolare il modo in cui le cellule non cancerose nel microambiente tumorale possono influenzare la crescita e la progressione del tumore. La linea cellulare CCD-1095Sk è quindi preziosa per la ricerca sul cancro, in particolare per comprendere gli aspetti stromali del cancro della pelle.

Le cellule CCD-1095Sk presentano una morfologia da fibroblasti, caratterizzata da una forma allungata a fuso, tipica delle cellule del tessuto connettivo che producono componenti della matrice extracellulare essenziali per la riparazione dei tessuti e l'integrità strutturale. Queste cellule sono aderenti, crescono in monostrati e sono note per la loro robustezza in varie condizioni sperimentali in vitro. Sono utilizzate per modellare il comportamento dei fibroblasti nella pelle normale e per esaminare i cambiamenti nell'attività dei fibroblasti in condizioni di cancro, che possono includere la secrezione di fattori di crescita, citochine e metalloproteinasi della matrice. In quanto tali, forniscono uno strumento prezioso per gli studi farmacologici e lo sviluppo di strategie terapeutiche mirate all'ambiente tumorale.

Tessuto
La pelle
Malattia
Carcinoma duttale
Applicazioni
coltura cellulare 3D
Sinonimi
  • CCD1095Sk

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CCD-1095Sk (numero di catalogo Cytion 300642)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2344

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
37 anni