Siirry sisältöön
CCD-1095Sk
Kudos
Iho
Sairaus
Duktaalinen karsinooma
Synonyymit
CCD1095Sk

Asiakirjat

CCD-1095Sk

Cell line · Tuotenumero 300642

CCD-1095Sk is a fibroblast cell line derived from the skin of a human male. It was established from a biopsy of uninvolved skin taken from a patient who h...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CCD-1095Sk on fibroblastisolulinja, joka on peräisin miehen ihosta. Se on muodostettu biopsiasta, joka on otettu potilaalta, jolla oli levyepiteelisyöpä. Tätä solulinjaa käytetään ensisijaisesti tutkimuksissa, joissa tutkitaan ihosolujen ja syöpäsolujen välisiä vuorovaikutuksia ja erityisesti sitä, miten kasvaimen mikroympäristön muut kuin syöpäsolut voivat vaikuttaa kasvaimen kasvuun ja etenemiseen. CCD-1095Sk-solulinja on näin ollen arvokas syöpätutkimuksessa, erityisesti ihosyövän stroomaan liittyvien näkökohtien ymmärtämisessä.

CCD-1095Sk-soluilla on fibroblastien morfologia, jolle on ominaista sidekudossoluille tyypillinen karamellimainen, pitkänomainen muoto, joka tuottaa solunulkoisen matriisin komponentteja, jotka ovat välttämättömiä kudoksen korjaamisen ja rakenteellisen eheyden kannalta. Nämä solut ovat tarttuvia, kasvavat monolayereissä ja ovat tunnettuja kestävyydestään erilaisissa in vitro -koeolosuhteissa. Niitä käytetään fibroblastien käyttäytymisen mallintamiseen normaalissa ihossa ja fibroblastien toiminnan muutosten tutkimiseen syöpäolosuhteissa, joihin voi sisältyä kasvutekijöiden, sytokiinien ja matriksin metalloproteinaasien eritystä. Sellaisenaan ne ovat korvaamaton väline farmakologisia tutkimuksia ja kasvainympäristöön kohdistuvien hoitostrategioiden kehittämistä varten.

Kudos
Iho
Sairaus
Duktaalinen karsinooma
Sovellukset
3D-soluviljely
Synonyymit
  • CCD1095Sk

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
CCD-1095Sk (Cytionin luettelonumero 300642)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2344

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
37 vuotta