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HCC1395
Gewebe
Brust
Krankheit
Karzinom
Synonyme
HCC-1395, SCC-1395, Hamon Cancer Center 1395

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HCC1395

Cell line · Artikelnummer 305546

The HCC1395 cell line is a model derived from a human basal-like breast cancer, a subtype often associated with triple-negative breast cancer (TNBC). This...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HCC1395-Zelllinie ist ein Modell, das von einem menschlichen basalähnlichen Brustkrebs abgeleitet ist, einem Subtyp, der häufig mit dreifach negativem Brustkrebs (TNBC) assoziiert wird. Diese Zelllinie ist für ihre hohe genetische Komplexität bekannt, die eine erhebliche genomische Instabilität und ein bemerkenswertes Mutationsprofil umfasst, das typisch für aggressive Brustkrebsarten ist. In Studien, die sich auf HCC1395 konzentrierten, wurde eine beträchtliche Anzahl von somatischen Mutationen und Kopienzahlvariationen identifiziert, was zu seiner Einstufung als repräsentatives Modell für die TNBC-Forschung beigetragen hat.

HCC1395 ist besonders wichtig für die Erforschung der Mechanismen, die der Medikamentenresistenz und der Metastasierung bei basalähnlichen Brustkrebsarten zugrunde liegen. In einer Studie wurde diese Zelllinie verwendet, um die Auswirkungen der Ausschaltung von Genen zu untersuchen, die mit der Zellmigration in Verbindung gebracht werden, wie z. B. ZEB2, und es zeigte sich, dass die Herunterregulierung dieses Gens das invasive Potenzial von HCC1395 verringern könnte. Darüber hinaus finden sich in der Mutationslandschaft dieser Zelllinie häufig Veränderungen in Genen, die mit der DNA-Schadensreaktion und der Regulierung des Zellzyklus zusammenhängen, wie z. B. TP53, das bei basalähnlichen Brustkrebsarten häufig mutiert ist.

Diese Eigenschaften machen HCC1395 zu einem wichtigen Instrument für präklinische Studien, in denen neue therapeutische Strategien untersucht werden, einschließlich gezielter und kombinierter Therapien zur Überwindung von Resistenzen. Durch die Einbeziehung von Hochdurchsatz-Sequenzierung und funktionellen Genomik-Ansätzen nutzen Forscher HCC1395, um die Pathophysiologie von TNBC besser zu verstehen und so zur Entwicklung wirksamerer Behandlungsmethoden beizutragen.

Gewebe
Brust
Krankheit
Karzinom
Synonyme
  • HCC-1395
  • SCC-1395
  • Hamon Cancer Center 1395

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzelle

04Bezeichner

Quellenangabe
HCC1395 (Cytion-Katalognummer 305546)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1249

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Epitheliales Glykoprotein 2 (EGP2), Zytokeratin 19
Onkogene
Her2/neu-, p53+
Mutationsprofil
Mutation: TP53, p.Arg175His (c.524G>A), homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 4,5 g/L Glucose, w: 2 mM L-Glutamin, w: 10 mM HEPES, w: 1 mM Natriumpyruvat, w: 1,5 g/L NaHCO3 (820702a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Verwenden Sie für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml. Bedecken Sie dann die Zellen vollständig mit TrypLE Express, wobei Sie 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwenden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
43 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch