Mine otse sisu juurde
HCC1395
Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
HCC-1395, SCC-1395, Hamon Cancer Center 1395

Dokumendid

HCC1395

Cell line · Toote number 305546

The HCC1395 cell line is a model derived from a human basal-like breast cancer, a subtype often associated with triple-negative breast cancer (TNBC). This...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC1395 rakuliin on mudel, mis on saadud inimese basaalsest rinnavähist, mis on sageli kolmiknegatiivse rinnavähi (TNBC) alatüüp. See rakuliin on tuntud oma suure geneetilise keerukuse poolest, mis hõlmab märkimisväärset genoomset ebastabiilsust ja märkimisväärset mutatsiooniprofiili, mis on tüüpiline agressiivsetele rinnavähivormidele. HCC1395-le keskenduvates uuringutes on tuvastatud märkimisväärne arv somaatilisi mutatsioone ja koopiaarvu muutusi, mis on aidanud kaasa selle liigitamisele TNBC uuringute representatiivseks mudeliks.

HCC1395 on eriti oluline, et uurida ravimresistentsuse ja metastaaside tekke aluseks olevaid mehhanisme basaalsete rinnavähivormide puhul. Üks uuring tõi esile selle rakuliini kasutamise rakkude migratsiooniga seotud geenide, näiteks ZEB2, vaigistamise mõju hindamiseks, mis näitas, et selle alareguleerimine võib vähendada HCC1395 invasiivset potentsiaali. Lisaks sisaldab selle rakuliini mutatsioonimaastik sageli muutusi geenides, mis on seotud DNA kahjustustele reageerimise ja rakutsükli regulatsiooniga, näiteks TP53, mis on basaalsete rinnavähivormide puhul sageli muteerunud.

Need omadused muudavad HCC1395 oluliseks vahendiks prekliinilistes uuringutes, millega uuritakse uusi ravistrateegiaid, sealhulgas resistentsuse ületamisele suunatud siht- ja kombinatsiooniteraapiaid. Kõrge läbilaskevõimega sekveneerimise ja funktsionaalse genoomika lähenemisviiside abil kasutavad teadlased HCC1395-d TNBC patofüsioloogia paremaks mõistmiseks, aidates kaasa tõhusamate ravikavade väljatöötamisele.

Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • HCC-1395
  • SCC-1395
  • Hamon Cancer Center 1395

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakk

04Tunnused

Viide
HCC1395 (Cytioni katalooginumber 305546)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1249

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Epiteeli glükoproteiin 2 (EGP2), tsütokeratiin 19
Onkogeenid
Her2/neu-, p53+
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Arg175His (c.524G>A), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 2 mM L-glutamiini, w: 10 mM HEPES, w: 1 mM naatriumpüruvaati, w: 1,5 g/L NaHCO3 (820702a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
43 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia