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HCC1395
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma
Sinónimos
HCC-1395, SCC-1395, Hamon Cancer Center 1395

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HCC1395

Cell line · Número do produto 305546

The HCC1395 cell line is a model derived from a human basal-like breast cancer, a subtype often associated with triple-negative breast cancer (TNBC). This...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular HCC1395 é um modelo derivado de um cancro da mama humano do tipo basal, um subtipo frequentemente associado ao cancro da mama triplo-negativo (TNBC). Esta linha celular é conhecida pela sua elevada complexidade genética, que inclui uma instabilidade genómica significativa e um perfil de mutações notável, típico dos cancros da mama agressivos. Estudos centrados na HCC1395 identificaram um número considerável de mutações somáticas e variações do número de cópias, contribuindo para a sua classificação como um modelo representativo para a investigação do TNBC.

O HCC1395 é especialmente relevante para a exploração dos mecanismos subjacentes à resistência aos medicamentos e às metástases nos cancros da mama do tipo basal. Um estudo destacou a utilização desta linha celular para avaliar o impacto do silenciamento de genes associados à migração celular, como o ZEB2, revelando que a sua regulação negativa poderia reduzir o potencial invasivo do HCC1395. Além disso, o panorama de mutações desta linha celular inclui frequentemente alterações em genes relacionados com a resposta a danos no ADN e com a regulação do ciclo celular, como o TP53, que está frequentemente mutado em cancros da mama do tipo basal.

Estas caraterísticas fazem do HCC1395 uma ferramenta importante para estudos pré-clínicos que investigam novas estratégias terapêuticas, incluindo terapias direcionadas e combinadas destinadas a ultrapassar a resistência. Ao incorporar sequenciação de alto rendimento e abordagens de genómica funcional, os investigadores utilizam o HCC1395 para compreender melhor a fisiopatologia do TNBC, contribuindo para o desenvolvimento de regimes de tratamento mais eficazes.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma
Sinónimos
  • HCC-1395
  • SCC-1395
  • Hamon Cancer Center 1395

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Célula epitelial

04Identificadores

Referência
HCC1395 (número de catálogo Cytion 305546)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1249

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Glicoproteína epitelial 2 (EGP2), citoqueratina 19
Oncogenes
Her2/neu-, p53+
Perfil mutacional
Mutação: TP53, p.Arg175His (c.524G>A), homozigótico

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, w: 4,5 g/L Glucose, w: 2 mM L-Glutamina, w: 10 mM HEPES, w: 1 mM Piruvato de sódio, w: 1,5 g/L NaHCO3 (820702a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para frascos T75, utilizar 5-10 ml. De seguida, cobrir completamente as células com TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
43 anos
Etnia
Caucasiano