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HK-2
Gewebe
Niere, Kortex, proximaler Tubulus
Synonyme
Hk-2, HK2, Human Kidney-2

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HK-2

Cell line · Artikelnummer 305021

The HK-2 cell line is a well-characterized human proximal tubular epithelial cell line derived from normal adult kidney tissue. These cells exhibit typica...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HK-2-Zelllinie ist eine gut charakterisierte humane proximale tubuläre Epithelzelllinie, die aus normalem erwachsenem Nierengewebe stammt. Diese Zellen weisen eine typische epitheliale Morphologie auf und behalten viele der biochemischen und funktionellen Eigenschaften proximaler Tubuluszellen bei, was sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der Nierenphysiologie und -pathophysiologie macht. HK-2-Zellen sind dafür bekannt, dass sie einen aktiven Transport durchführen können und Enzymaktivitäten an der Bürstengrenze aufweisen, die für ihre Rolle bei der Nierenrückresorption wesentlich sind.

HK-2-Zellen exprimieren eine Reihe von Transportern und Rezeptoren, unter anderem für Glukose, Aminosäuren und verschiedene Ionen, was ihre Rolle bei der Nierenfiltration und -rückresorption widerspiegelt. Sie reagieren auch auf hormonelle Regulierung, z. B. durch Parathormon und Aldosteron, die ihre Transportaktivitäten beeinflussen. Aufgrund dieser Eigenschaften werden HK-2-Zellen häufig in Nephrotoxizitätsstudien, beim Wirkstoffscreening und bei der Erforschung von Nierenerkrankungen wie akuten Nierenschäden und chronischen Nierenerkrankungen eingesetzt.

Darüber hinaus wurden HK-2-Zellen in Studien zur Erforschung von Nierenzellkarzinomen und anderen nierenbezogenen Krebsarten eingesetzt. Sie sind ein zuverlässiges In-vitro-System zur Untersuchung der zellulären Reaktionen auf toxische Substanzen, oxidativen Stress und Hypoxie. Forscher verwenden HK-2-Zellen auch zur Erforschung der molekularen Mechanismen, die der Fibrose und Entzündung in der Niere zugrunde liegen. Insgesamt ist die HK-2-Zelllinie ein wichtiges Instrument in der Nierenforschung, das Einblicke sowohl in die normale Nierenfunktion als auch in die Pathogenese von Krankheiten bietet.

Gewebe
Niere, Kortex, proximaler Tubulus
Synonyme
  • Hk-2
  • HK2
  • Human Kidney-2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
HK-2 (Cytion-Katalognummer 305021)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0302

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), exprimiert
Proteinexpression
Alkalische Phosphatase, Gamma-Glutamyltranspeptidase, Leucin-Aminopeptidase, saure Phosphatase, Cytokeratin, Alpha 3, Beta 1 Integrin, Fibronectin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Erwachsener
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch