Przejdź do treści
HK-2
Chusteczka
Nerka, kora, kanalik proksymalny
Synonimy
Hk-2, HK2, Human Kidney-2

Dokumenty

HK-2

Cell line · Numer produktu 305021

The HK-2 cell line is a well-characterized human proximal tubular epithelial cell line derived from normal adult kidney tissue. These cells exhibit typica...

€650.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HK-2 jest dobrze scharakteryzowaną ludzką linią komórkową nabłonka kanalików proksymalnych pochodzącą z prawidłowej tkanki nerki dorosłego człowieka. Komórki te wykazują typową morfologię nabłonka i zachowują wiele biochemicznych i funkcjonalnych właściwości komórek kanalików proksymalnych, co czyni je cennym modelem do badania fizjologii i patofizjologii nerek. Komórki HK-2 są znane ze swojej zdolności do wykonywania aktywnego transportu i wykazują aktywność enzymów granicy szczoteczkowej, które są niezbędne dla ich roli w procesach wchłaniania zwrotnego w nerkach.

Komórki HK-2 wykazują ekspresję szeregu transporterów i receptorów, w tym dla glukozy, aminokwasów i różnych jonów, co odzwierciedla ich rolę w filtracji nerkowej i reabsorpcji. Są one również wrażliwe na regulację hormonalną, taką jak hormon przytarczyc i aldosteron, które wpływają na ich aktywność transportową. Ze względu na te cechy, komórki HK-2 są szeroko stosowane w badaniach nefrotoksyczności, badaniach przesiewowych leków i badaniach nad chorobami nerek, takimi jak ostre uszkodzenie nerek i przewlekła choroba nerek.

Co więcej, komórki HK-2 zostały wykorzystane w badaniach nad rakiem nerkowokomórkowym i innymi nowotworami związanymi z nerkami. Stanowią one niezawodny system in vitro do badania odpowiedzi komórek na czynniki toksyczne, stres oksydacyjny i niedotlenienie. Naukowcy wykorzystują również komórki HK-2 do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw zwłóknienia i stanu zapalnego w nerkach. Ogólnie rzecz biorąc, linia komórkowa HK-2 jest kluczowym narzędziem w badaniach nad nerkami, oferując wgląd zarówno w prawidłową czynność nerek, jak i patogenezę chorób.

Chusteczka
Nerka, kora, kanalik proksymalny
Synonimy
  • Hk-2
  • HK2
  • Human Kidney-2

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
HK-2 (numer katalogowy Cytion 305021)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0302

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Epidermalny czynnik wzrostu (EGF), wyrażony
Ekspresja białek
Fosfataza alkaliczna, gamma glutamylotranspeptydaza, aminopeptydaza leucynowa, kwaśna fosfataza, cytokeratyna, integryna alfa 3, integryna beta 1, fibronektyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Dorosły
Pochodzenie etniczne
Europejski