HK-2
Cell line · Preces numurs 305021
The HK-2 cell line is a well-characterized human proximal tubular epithelial cell line derived from normal adult kidney tissue. These cells exhibit typica...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HK-2Cell line€650.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HK-2 šūnu līnija ir labi raksturota cilvēka proksimālā tubulārā epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no normāliem pieaugušo nieru audiem. Šīm šūnām piemīt tipiska epitēlija morfoloģija un tās saglabā daudzas proksimālo kanāliņu šūnu bioķīmiskās un funkcionālās īpašības, padarot tās par vērtīgu modeli nieru fizioloģijas un patofizioloģijas pētījumiem. HK-2 šūnas ir pazīstamas ar to spēju veikt aktīvu transportu un tām piemīt birstes robežu enzīmu aktivitāte, kas ir būtiska to lomai nieru reabsorbcijas procesos.
HK-2 šūnas ekspresē virkni transportieru un receptoru, tostarp glikozes, aminoskābju un dažādu jonu transportierus, kas atspoguļo to lomu nieru filtrācijā un reabsorbcijā. Tās reaģē arī uz hormonālo regulāciju, piemēram, parathormonu un aldosteronu, kas ietekmē to transporta aktivitāti. Šo īpašību dēļ HK-2 šūnas plaši izmanto nefrotoksicitātes pētījumos, zāļu skrīningā un nieru slimību, piemēram, akūtu nieru bojājumu un hronisku nieru slimību, pētījumos.
Turklāt HK-2 šūnas ir izmantotas pētījumos, kuros pētīta nieru šūnu karcinoma un citi ar nierēm saistīti vēža veidi. Tās ir uzticama in vitro sistēma šūnu reakcijas uz toksiskām vielām, oksidatīvo stresu un hipoksiju izpētei. Pētnieki izmanto HK-2 šūnas arī, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir nieru fibrozes un iekaisuma pamatā. Kopumā HK-2 šūnu līnija ir ļoti svarīgs instruments nieru pētniecībā, jo tā sniedz ieskatu gan par normālu nieru darbību, gan slimību patoģenēzi.
- Audums
- Nieres, garoza, proksimālais kanāliņš
- Sinonīmi
- Hk-2
- HK2
- Human Kidney-2
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
04Identifikatori
- Atsauce
- HK-2 (Cytion kataloga numurs 305021)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0302
05Pazīmes un uzņēmība
- Ekspresētie receptori
- Epidermas augšanas faktors (EGF), kas izteikts
- Proteīnu ekspresija
- Sārmainā fosfatāze, gamma glutamiltranspeptīdāze, leicīna aminopeptidāze, skābes fosfatāze, citokeratīns, alfa 3, beta 1 integrīns, fibronektīns
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- Pieaugušo
- Etniskā piederība
- Eiropas
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
