Pāriet uz saturu
HK-2
Audums
Nieres, garoza, proksimālais kanāliņš
Sinonīmi
Hk-2, HK2, Human Kidney-2

Dokumenti

HK-2

Cell line · Preces numurs 305021

The HK-2 cell line is a well-characterized human proximal tubular epithelial cell line derived from normal adult kidney tissue. These cells exhibit typica...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HK-2 šūnu līnija ir labi raksturota cilvēka proksimālā tubulārā epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no normāliem pieaugušo nieru audiem. Šīm šūnām piemīt tipiska epitēlija morfoloģija un tās saglabā daudzas proksimālo kanāliņu šūnu bioķīmiskās un funkcionālās īpašības, padarot tās par vērtīgu modeli nieru fizioloģijas un patofizioloģijas pētījumiem. HK-2 šūnas ir pazīstamas ar to spēju veikt aktīvu transportu un tām piemīt birstes robežu enzīmu aktivitāte, kas ir būtiska to lomai nieru reabsorbcijas procesos.

HK-2 šūnas ekspresē virkni transportieru un receptoru, tostarp glikozes, aminoskābju un dažādu jonu transportierus, kas atspoguļo to lomu nieru filtrācijā un reabsorbcijā. Tās reaģē arī uz hormonālo regulāciju, piemēram, parathormonu un aldosteronu, kas ietekmē to transporta aktivitāti. Šo īpašību dēļ HK-2 šūnas plaši izmanto nefrotoksicitātes pētījumos, zāļu skrīningā un nieru slimību, piemēram, akūtu nieru bojājumu un hronisku nieru slimību, pētījumos.

Turklāt HK-2 šūnas ir izmantotas pētījumos, kuros pētīta nieru šūnu karcinoma un citi ar nierēm saistīti vēža veidi. Tās ir uzticama in vitro sistēma šūnu reakcijas uz toksiskām vielām, oksidatīvo stresu un hipoksiju izpētei. Pētnieki izmanto HK-2 šūnas arī, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas ir nieru fibrozes un iekaisuma pamatā. Kopumā HK-2 šūnu līnija ir ļoti svarīgs instruments nieru pētniecībā, jo tā sniedz ieskatu gan par normālu nieru darbību, gan slimību patoģenēzi.

Audums
Nieres, garoza, proksimālais kanāliņš
Sinonīmi
  • Hk-2
  • HK2
  • Human Kidney-2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HK-2 (Cytion kataloga numurs 305021)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0302

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Epidermas augšanas faktors (EGF), kas izteikts
Proteīnu ekspresija
Sārmainā fosfatāze, gamma glutamiltranspeptīdāze, leicīna aminopeptidāze, skābes fosfatāze, citokeratīns, alfa 3, beta 1 integrīns, fibronektīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo
Etniskā piederība
Eiropas