Preskoči na vsebino
HK-2
Tkivo
Ledvica, skorja, proksimalni kanalček
Sinonimi
Hk-2, HK2, Human Kidney-2

Dokumenti

HK-2

Cell line · Številka izdelka 305021

The HK-2 cell line is a well-characterized human proximal tubular epithelial cell line derived from normal adult kidney tissue. These cells exhibit typica...

€650.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HK-2 je dobro opisana celična linija človeškega proksimalnega tubularnega epitelija, pridobljena iz normalnega tkiva odraslih ledvic. Te celice imajo značilno epitelijsko morfologijo ter ohranjajo številne biokemične in funkcionalne lastnosti proksimalnih tubularnih celic, zato so dragocen model za preučevanje fiziologije in patofiziologije ledvic. Celice HK-2 so znane po svoji sposobnosti aktivnega transporta in encimskih aktivnostih, ki so bistvene za njihovo vlogo v procesih ledvične reabsorpcije.

Celice HK-2 izražajo vrsto prenašalcev in receptorjev, vključno s tistimi za glukozo, aminokisline in različne ione, kar kaže na njihovo vlogo pri ledvični filtraciji in reabsorpciji. Odzivajo se tudi na hormonsko regulacijo, kot sta paratiroidni hormon in aldosteron, ki vplivata na njihove transportne aktivnosti. Zaradi teh lastnosti se celice HK-2 pogosto uporabljajo v študijah nefrotoksičnosti, pri presejanju zdravil in raziskavah bolezni ledvic, kot sta akutna poškodba ledvic in kronična ledvična bolezen.

Poleg tega so bile celice HK-2 uporabljene v študijah, ki so preučevale ledvični karcinom in druge vrste raka, povezane z ledvicami. Zagotavljajo zanesljiv in vitro sistem za preučevanje celičnih odzivov na strupene snovi, oksidativni stres in hipoksijo. Raziskovalci uporabljajo celice HK-2 tudi za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za fibrozo in vnetje v ledvicah. Na splošno je celična linija HK-2 ključno orodje pri raziskavah ledvic, saj omogoča vpogled v normalno delovanje ledvic in patogenezo bolezni.

Tkivo
Ledvica, skorja, proksimalni kanalček
Sinonimi
  • Hk-2
  • HK2
  • Human Kidney-2

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
HK-2 (kataloška številka Cytion 305021)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0302

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Epidermalni rastni dejavnik (EGF), izražen
Ekspresija beljakovin
Alkalna fosfataza, gama glutamiltranspeptidaza, levcin aminopeptidaza, kisla fosfataza, citokeratin, alfa 3, beta 1 integrin, fibronektin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Odrasli
Etnična pripadnost
Evropski