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HK-2
Tecido
Rim, córtex, túbulo proximal
Sinónimos
Hk-2, HK2, Human Kidney-2

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HK-2

Cell line · Número do produto 305021

The HK-2 cell line is a well-characterized human proximal tubular epithelial cell line derived from normal adult kidney tissue. These cells exhibit typica...

€650.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HK-2 é uma linha celular epitelial tubular proximal humana bem caracterizada, derivada de tecido renal adulto normal. Estas células exibem uma morfologia epitelial típica e retêm muitas das propriedades bioquímicas e funcionais das células tubulares proximais, o que as torna um modelo valioso para o estudo da fisiologia e fisiopatologia renais. As células HK-2 são conhecidas pela sua capacidade de realizar transporte ativo e exibem actividades enzimáticas de borda em escova, que são essenciais para o seu papel nos processos de reabsorção renal.

As células HK-2 expressam uma série de transportadores e receptores, incluindo os de glicose, aminoácidos e vários iões, o que reflecte o seu papel na filtração e reabsorção renal. São também sensíveis à regulação hormonal, como a hormona paratiroide e a aldosterona, que influenciam as suas actividades de transporte. Devido a estas caraterísticas, as células HK-2 são amplamente utilizadas em estudos de nefrotoxicidade, no rastreio de medicamentos e na investigação de doenças renais, como a lesão renal aguda e a doença renal crónica.

Além disso, as células HK-2 têm sido utilizadas em estudos sobre o carcinoma de células renais e outros cancros relacionados com os rins. Constituem um sistema in vitro fiável para examinar as respostas celulares a agentes tóxicos, stress oxidativo e hipoxia. Os investigadores também utilizam as células HK-2 para explorar os mecanismos moleculares subjacentes à fibrose e à inflamação no rim. De um modo geral, a linha celular HK-2 é uma ferramenta essencial na investigação renal, oferecendo conhecimentos sobre a função renal normal e a patogénese das doenças.

Tecido
Rim, córtex, túbulo proximal
Sinónimos
  • Hk-2
  • HK2
  • Human Kidney-2

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
HK-2 (número de catálogo da Cytion 305021)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0302

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Fator de crescimento epidérmico (EGF), expresso
Expressão proteica
Fosfatase alcalina, gama glutamiltranspeptidase, leucina aminopeptidase, fosfatase ácida, citoqueratina, alfa 3, integrina beta 1, fibronectina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Adulto
Etnia
Europeu