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Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC)
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Zahnärztliche

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Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC)

Cell line · Artikelnummer 300702

Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC) are multipotent stem cells isolated from the dental pulp of adult teeth, commonly third molars. These cells are...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC) sind multipotente Stammzellen, die aus dem Zahnmark erwachsener Zähne, in der Regel der dritten Backenzähne, isoliert werden. Diese Zellen sind für die regenerative Medizin besonders wertvoll, da sie sich in eine Vielzahl von Zelltypen differenzieren können, darunter solche, die Knochen-, Knorpel-, Fett- und Zahngewebe bilden. DPSCs zeichnen sich durch eine hohe Proliferationsfähigkeit aus, was sie zu einer robusten Wahl für Tissue Engineering und zellbasierte therapeutische Anwendungen macht.

DPSCs besitzen auch bedeutende immunmodulatorische Eigenschaften, die zu ihrem potenziellen Einsatz bei der Behandlung von Entzündungen beitragen. Neben der Regeneration von Zahngewebe wurden sie auch auf ihre Fähigkeit hin untersucht, Knochendefekte zu reparieren, sowie auf ihre Anwendung in neurologischen Therapien. Ihre relativ leichte Zugänglichkeit und die Fähigkeit, die Lebensfähigkeit nach der Kryokonservierung aufrechtzuerhalten, machen DPSC zu einer attraktiven Option für die klinische Forschung und die therapeutische Entwicklung, insbesondere in den Bereichen der regenerativen Zahnmedizin, der Orthopädie und der neurodegenerativen Erkrankungen.

Gewebe
Zahnärztliche
Anwendungen
Arzneimitteltests, regenerative Medizin, Krankheitsforschung

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
Humane Zahnmarkstammzellen (DPSC, hDPSC) (Cytion Katalognummer 300702)
NCBI-Steuer-ID
9606

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, ohne: Ribonukleoside, w/o: Deoxyribonukleoside, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 90 % FBS + 10 % DMSO, um die Lebensfähigkeit zu erhalten, oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Genesung zu fördern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.