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Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC)
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歯科

Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC)

Cell line · 製品番号 300702

Human Dental Pulp Stem Cells (DPSC, hDPSC) are multipotent stem cells isolated from the dental pulp of adult teeth, commonly third molars. These cells are...

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01概要

説明

ヒト歯髄幹細胞(DPSC, hDPSC)は、成人の歯、一般的には第三大臼歯の歯髄から単離された多能性幹細胞である。これらの細胞は、骨、軟骨、脂肪、歯の組織を形成する細胞を含む様々な細胞型に分化する能力を持つため、再生医療において特に価値が高い。DPSCはその高い増殖能で注目されており、組織工学や細胞ベースの治療応用に適した細胞である。

DPSCはまた、重要な免疫調節特性も有しており、炎症性疾患の治療に使用される可能性がある。DPSCは歯科組織再生以外にも、骨欠損の修復や神経治療への応用が研究されている。比較的容易に入手でき、凍結保存後も生存能力を維持できることから、DPSCは、特に再生歯学、整形外科、神経変性疾患の分野において、臨床研究や治療開発のための魅力的な選択肢となっている。

ティッシュ
歯科
用途
薬物検査、再生医療、疾病研究

02分類

生物
人間
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03識別子

引用
ヒト歯髄幹細胞(DPSC, hDPSC)(Cytion カタログ番号 300702)
NCBI 納税者番号
9606

04取り扱いと飼育

培地
αMEM、w: 2.0mM安定グルタミン、w/o:リボヌクレオシド、w/o:デオキシリボヌクレオシド, w: 1.0 mM ピルビン酸ナトリウム, w: 2.2g/L NaHCO3
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、2 ng/mL bFGFを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、生存率を維持するために90%FBS+10%DMSOを使用するか、回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。